左*（LT）酶聯(lián)免疫分析

時(shí)間：2013/6/5閱讀：278

左*（LT）酶聯(lián)免疫分析

試劑盒使用說(shuō)明書(shū)

本試劑盒僅供研究使用。

1 使用目的：

本試劑盒用于飼料、魚(yú)、蝦和肉類(lèi)組織（如雞、牛肉和豬肉），血清和尿樣中左*（LT）殘留的定量檢測(cè)。

2樣品處理程序（樣品在提取過(guò)程中，要嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)操作，提取過(guò)程中應(yīng)準(zhǔn)確稀釋?zhuān)駝t會(huì)出現(xiàn)結(jié)果不準(zhǔn)確，樣品應(yīng)當(dāng)保存在陰涼避光之處及冷藏保存）

2.1取10g粉碎的樣品，加 20ml 70%甲醇溶液

2.2強(qiáng)力振蕩3分鐘

2.3用Whatman 濾紙過(guò)濾

2.4取25μl處理后的樣品，加入25μl*于反應(yīng)孔中（樣本稀釋倍數(shù)為2）

3 酶免分析步驟

3.1 實(shí)驗(yàn)須知

3.1.1 實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前請(qǐng)將所有試劑于盒外充分恢復(fù)至室溫（25±2℃），時(shí)間約2小時(shí)。回溫至室溫（25±2℃）后再取出微孔條，多余的微孔條重新密封立即于2~8℃干燥保存

注：一定保證回溫充分，否則影響檢測(cè)的度和準(zhǔn)確度。

3.1.2 使用后請(qǐng)立即將試劑放回2~8℃保存

3.1.3 請(qǐng)不要改變分析程序

3.1.4 請(qǐng)使用的微量移液器

3.1.5 操作一旦開(kāi)始，請(qǐng)不要中斷任何程序

3.1.6 ELISA結(jié)果的可重復(fù)性極大程度的取決于操作程序，請(qǐng)嚴(yán)格按照要求操作

3.1.7 為避免交叉污染，每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品均應(yīng)使用不同的吸頭加樣

3.1.8 加樣時(shí)請(qǐng)勿讓吸頭接觸微孔中的溶液或內(nèi)表面

3.2 分析步驟

3.2.1 預(yù)*行編號(hào)，標(biāo)記B0、標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的位置，推薦進(jìn)行雙孔檢測(cè)

3.2.2 取所需數(shù)量的微孔（微孔條可拆），將多余板條重新密封并立即放回2~8℃保存

3.2.3 樣品稀釋液（10×）、濃縮洗滌液（20×）稀釋成工作液（蒸餾水或去離子水稀釋）

3.2.4 在B0孔中加入50μl0.0 ng/ ml標(biāo)準(zhǔn)品溶液

3.2.5 在各標(biāo)準(zhǔn)孔中加入50μl的標(biāo)準(zhǔn)品溶液

3.2.6 在各樣品孔中加入50μl樣品溶液

3.2.7 在所有孔中加入50μl的左*（LT）抗體酶結(jié)合物

3.2.8 輕輕晃動(dòng)反應(yīng)板幾秒鐘。

3.3 37℃溫浴30min （溫浴過(guò)程中不時(shí)輕拍反應(yīng)板，可以減少雙孔誤差）

3.3.1 甩掉孔中液體，用洗液洗滌微孔板5次，zui后一次應(yīng)在吸水紙上拍打以*除去孔中液體。

3.4 反應(yīng)

3.4.1 洗滌程序完成后，立即用微量移液器在每個(gè)微孔中先加入50μl顯色液A，再加 50μl顯色液B；輕微晃動(dòng)反應(yīng)板使之*混勻

3.4.2 37℃溫浴10min

3.4.3 每孔中加入50μl終止液，混勻

3.4.4 在450nm下檢測(cè)吸光度，結(jié)果在5min內(nèi)讀取。

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