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上海哈靈生物科技有限公司
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通用型DNA損傷彗星檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書
2015-5-4 閱讀(1196)
| 提 供 商 | 上海哈靈生物科技有限公司 | 資料大小 | 55.6KB |
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| 資料圖片 | 下載次數(shù) | 261次 | |
| 資料類型 | WORD 文檔 | 瀏覽次數(shù) | 1196次 |
主要用途
通用型DNA損傷彗星檢測(cè)試劑是一種旨在采用組織細(xì)胞堿性凝膠電泳，在電場(chǎng)環(huán)境下，損傷變性的DNA片段遷移形成特定的形態(tài)，即DNA移動(dòng)尾巴，來(lái)進(jìn)行體外評(píng)價(jià)和半定量分析DNA損傷程度的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于新鮮動(dòng)物細(xì)胞、組織、血液、骨髓等樣品的DNA損傷研究，包括DNA鏈斷裂、氧化性堿基損傷、DNA剪切損傷、DNA交聯(lián)、DNA修復(fù)等，應(yīng)用于環(huán)境和藥物毒理學(xué)、放射學(xué)、氧化應(yīng)急反應(yīng)等研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，性能穩(wěn)定，操作簡(jiǎn)便，重復(fù)一致。
技術(shù)背景
彗星檢測(cè)技術(shù)（Comet assay），又稱為單細(xì)胞凝膠電泳檢測(cè)技術(shù)（single cell gel electrophoresis assay；SCGE）或微凝膠電泳檢測(cè)技術(shù)（microgel electrophoresis assay），是基于變性切離的DNA片段，在電場(chǎng)的影響下，從細(xì)胞中移出的原理，而完整的超螺旋DNA仍然保持在細(xì)胞核內(nèi)。通過(guò)凝膠電泳，呈現(xiàn)出分子遷移圖形，形成彗星拖尾（comet tail）現(xiàn)象，即完整DNA的細(xì)胞染色體為“頭"，而松散和斷裂的DNA為“尾"，以此評(píng)價(jià)DNA損傷程度。這是分析單一細(xì)胞DNA鏈斷裂的敏感方法之一。其技術(shù)方法的基本步驟是：*，細(xì)胞固定包埋在凝膠里；第二，細(xì)胞裂解處理；第三，DNA變性處理；第四，電泳遷移；第五，染色和圖像分析。由此觀察DNA遷移形態(tài)，進(jìn)行體外檢測(cè)，成為細(xì)胞DNA損傷研究的基本手段。其中電泳條件將決定檢測(cè)的敏感程度。堿性電泳（alkaline electrophoresis）為常規(guī)電泳檢測(cè)，可以檢測(cè)單鏈DNA斷裂、雙鏈DNA斷裂、大部分無(wú)嘌呤核酸位點(diǎn)（apurinic site）和無(wú)嘧啶核酸位點(diǎn)（apyrimidic site）、堿不穩(wěn)定DNA結(jié)合物（alkali-labile DNA adduct）等DNA損傷。
