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生物試劑實驗時常見問題
2013-10-15 閱讀(663)
生物試劑實驗時常見問題
1 試劑空白，線性范圍變窄
現象：高值測不高。
原因：生產試劑時有效成分投料量不足;試劑成份穩定性較差。
1.2 靈敏度變低
現象：酶促反應速度曲線斜率下降，測定結果有嚴重系統誤差。
原因：試劑底物濃度不足。
1.3 低值偏高
現象：試劑空白的變化曲線（xī光度VS時間）明顯波動。
原因：試劑自身不穩定，自行分解；工具酶純度不夠，雜酶hán量超限，導致干擾作用。
2 樣品信息
樣品的溶xuè、脂xuè、黃疸等會對檢測結果產生非化學反應的干擾。因此，應該根據溶xuè、脂濁、黃疸的光譜xī收特性，采用雙波長或多波長的檢測模式，并在結果計算中扣除因溶xuè、脂xuè、黃疸引起的影響，減少干擾程度。
3 測定范圍
每種待測物都有一個可測定的濃度或活性范圍，樣品結果若超過此范圍，分析儀將顯示結果超過范圍的提示。這種現象表示試劑已經變質，應更換合格試劑。
4 底物耗盡
使用連續監測fǎ、兩點fǎ測定酶活性時，若酶活性非常高，底物接近被耗盡，xī光度上升或下降會超過某一xī光度變化范圍，監測期的xī光度將偏離線性，使檢測結果不可靠。
5 酶的預活化
測定xuè清中的某些酶，如CK，離體（采xuè）后很容易失去活性。失活的原因是酶活性中心的活性基因巰基（一SH）被氧化造成的。只有通囘過適當的還原作用才能重新激活。如CK—NAC試劑盒即hán有CK活化劑，名為N一乙酰半胱氨酸。實驗研究證明，NAC對xuè清中已失活的CK活化過程約需180 S。這就是CK測定為什么要延遲時間較長的理論依據。在AST，ALT采用IFCC推薦方fǎ測定時需要磷酸吡哆醛預活化。需要強調：hán有活化劑的生化試劑，其測定酶活性的結果要高些。
