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當(dāng)前位置:上海源葉生物科技有限公司 >>公司動(dòng)態(tài)>>曾凡一教授綜述:卵母細(xì)胞和胚胎冷凍保存
在過(guò)去的幾十年中, 哺乳動(dòng)物卵母細(xì)胞和胚胎冷凍保存技術(shù)因在輔助生殖技術(shù)及實(shí)際生產(chǎn)中應(yīng)用廣泛, 其研究發(fā)展尤為迅速. 多個(gè)物種(包括人)的卵母細(xì)胞和胚胎冷凍保存研究獲得了受孕和活產(chǎn)的成功佐證, 為冷凍保存技術(shù)的臨床應(yīng)用提供了理論依據(jù), 并成為體外受精*的環(huán)節(jié). 盡管哺乳動(dòng)物卵母細(xì)胞和胚胎的冷凍保存技術(shù)的研發(fā)和應(yīng)用取得了巨大進(jìn)展, 例如為可能不育的患者貯藏生殖潛能、卵子凍存庫(kù)的建立以及卵母細(xì)胞和胚胎的跨國(guó)運(yùn)輸, 但成功率仍達(dá)不到使用新鮮卵母細(xì)胞和胚胎的水平, 還存在許多難題有待解決。
就此近期上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院曾凡一教授研究組發(fā)表綜述,針對(duì)低溫保存技術(shù)中制約冷凍效率和成功率的主要問(wèn)題進(jìn)行了綜述, 旨在解決技術(shù)研發(fā)中遇到的瓶頸, 為改進(jìn)技術(shù)提供借鑒和參考, 鼓勵(lì)低溫生物學(xué)研究者繼續(xù)開(kāi)展深入研究, 加快推進(jìn)冷凍保存技術(shù)在人類和動(dòng)物輔助生殖技術(shù)中的實(shí)際應(yīng)用。
雌配子和胚胎冷凍保存概念的出現(xiàn)是從Chang報(bào)道低溫貯藏對(duì)兔(Oryctolagus cuniculus)卵母細(xì)胞、受精卵及胚胎的影響結(jié)果開(kāi)始的. 隨后, 配子、 胚胎及卵巢組織的冷凍保存方法相繼得到了長(zhǎng)足的發(fā)展.
1977 年, 報(bào)道了凍存小鼠(Mus musculus)卵母細(xì)胞成功妊娠并產(chǎn)仔, 之后在這個(gè)領(lǐng)域開(kāi)展一系列物種包括人類(Homo sapiens)、兔、牛(Bos tauru)和馬(Equus ferus caballus)的研究.
目前認(rèn)為, 慢速冷凍和玻璃化這2種方法的出現(xiàn)可滿足哺乳動(dòng)物卵母細(xì)胞和胚胎的成功冷凍保存的要求. 研究表明, 緩慢冷凍的成活率和抑制率低, 并可能導(dǎo)致紡錘體異常, 這些不良影響限制了慢速冷凍技術(shù)的應(yīng)用. Rall 和 Fahy發(fā)明了玻璃化法, 已被廣泛應(yīng)用于人類、各種家畜和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物卵母細(xì)胞以及哺乳動(dòng)物胚胎的冷凍保存. 研究認(rèn)為, 玻璃化法是比慢速冷凍更好的冷凍保存方法. 生物通 www.ebiotrade.com
無(wú)論使用何種冷凍保存方法, 經(jīng)凍融的配子或胚胎受孕率仍不及新鮮的配子或胚胎. 這意味著為找到提高卵母細(xì)胞和胚胎冷凍保存成功率的辦法, 需不斷優(yōu)化凍存技術(shù)。
文章指出,與玻璃化冷凍技術(shù)開(kāi)始使用的zui初幾年相比,如今的技術(shù)應(yīng)用成果取得了顯著進(jìn)展. 哺乳動(dòng)物卵母細(xì)胞或胚胎的冷凍保存方法可分為慢速冷凍和玻璃化冷凍法, 根據(jù)文章提到的大量文獻(xiàn)資料明顯可以看出, 玻璃化法是更為行之有效的冷存方法, 并為其在人工輔助生殖技術(shù)眾多領(lǐng)域的應(yīng)用提供了廣闊的前景.
人類胚胎冷凍保存技術(shù)的完善將允許移植盡可能少的胚胎, 從而降低多胎妊娠治療中zui嚴(yán)重的并發(fā)癥的發(fā)病率. 隨著玻璃化冷凍的物理和生物學(xué)原理更深層次地探索, 未來(lái)冷凍保存技術(shù)將會(huì)取得更更成功的應(yīng)用成果.
教授等人對(duì)卵母細(xì)胞/胚胎冷凍保存技術(shù)的展望如下:
(ⅰ) 卵母細(xì)胞或胚胎細(xì)胞質(zhì)膜的滲透性, 即便是同一物種也會(huì)隨著其成熟、 發(fā)育階段的變化而變化。因此, 即使采用相同的冷凍方案, 卵母細(xì)胞或胚胎在冷凍保存后的存活情況也是有差異的.
(ⅱ) 合理選擇毒性低的冷凍保護(hù)劑, 密切監(jiān)測(cè)其溫度、時(shí)間和溶液稀釋濃度, 以及從細(xì)胞中逐步添加和脫除的情況. 玻璃化保護(hù)劑的zui大優(yōu)勢(shì)是對(duì)細(xì)胞內(nèi)的水分?jǐn)_動(dòng)極小, 為哺乳動(dòng)物卵母細(xì)胞和胚胎玻璃化成功凍存的實(shí)現(xiàn)帶來(lái)了新的希望.
(ⅲ) 由于卵母細(xì)胞或胚胎會(huì)與液氮的開(kāi)放式容器直接接觸, 導(dǎo)致污染的高風(fēng)險(xiǎn)性, 因此需要不斷完善能夠降低污染風(fēng)險(xiǎn)的安全操作方法. zui近, 在使用不同類型的“封閉式”系統(tǒng)后取得了理想的結(jié)果, 為過(guò)渡到更密封更安全的玻璃化冷凍系統(tǒng)奠定了基礎(chǔ). 結(jié)果強(qiáng)調(diào)必須更加努力優(yōu)化封閉式玻璃化系統(tǒng)方案.
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