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ELISA為什么所有孔都*沒顏色

閱讀：1694發布時間：2014-12-15

ELISA自己包被抗體—封閉—加樣—二抗—HRP—TMB顯色，上述步驟應該是對的，為什么所有孔都*沒顏色.

做了6次了，怎么知道是哪一步出問題了，全是陰性？你的試驗想檢測什么？檢測抗原？檢測抗體？你這個實驗思路問題很大。
你自己先固定抗體，加樣，是不是加抗原？再加二抗，請問，加不加這個樣，也就是加不加這個抗原，影響實驗結果嗎？酶標二抗是和抗體結合的。還有你的二抗和一抗之間中間隔了個抗原，二抗還能和抗體結合嗎？

是想檢測抗原的，固定的一抗可以和抗原反應，同時也能和酶標二抗反應，不存在有東西隔在中間的情況。這個實驗思路是標準的啊，教科書上都是這么做的。

你這個實驗是不是，出現陰性結果，就是樣品是陽性？
我解釋一下，你實驗出現的問題：固定一抗，直接加酶標二抗，二抗結合上去，酶也結合上去，沖洗，去掉未結合的酶標二抗，加顯色劑，陽性。固定一抗，加抗原反應。加酶標二抗，如果抗原不影響酶標二抗和抗體結合的話，酶標二抗和一抗結合，沖洗未結合的二抗，加顯色劑，陽性。
那么，請問，加不加抗原，結果有什么不同？只有你的方法的結果是陰性的，才有說服力，不過靠陰性反應來確定抗原是不是存在，有點不靠譜。

如需購買抗體可我公司銷售人員或咨詢我公司在線客服。

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