一、Insulin牛胰島素試劑盒準備試劑與收集血樣
1、收集標本：血清、血漿（EDTA）、細胞培養上清液、組織勻漿等盡早檢測，2-8℃保存48小時；更長時間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復凍融。所有標本測定前用標本稀釋液作1：20稀釋（取10ul，加標本稀釋液190ul,稀釋20倍）。
2、標準品液配制：使用前加入1ml蒸餾水混勻，配成40ng/ml的溶液。設標準管8管，*管加標本稀釋液900ul，第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在*管中加入40ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復作對倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。
3、10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。
4、洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）
二、Insulin牛胰島素試劑盒檢測程序
1.加樣：每孔各加入標準品或待測樣品100ul，將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。
2.洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次，向濾紙上印干。
3.每孔中加入*抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。
4.洗板：同前。
5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。
6.洗板：同前。
7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應15分鐘。
8.每孔加入100ul終止液混勻。
9.30分鐘內用酶標儀在450nm處測吸光值。
三、Insulin牛胰島素結果計算與判斷
1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。
2.以標準品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上作圖，畫出標準曲線。
3.根據樣品OD值在該曲線圖上查出相應Insulin含量，再乘上稀釋倍數即可。
