現(xiàn)在由于ELISA試劑盒檢測的方便，許多尋常百信也會購買ELISA試劑盒來做實驗，ELISA試劑盒的種類很多，有人elisa試劑盒、小鼠elisa試劑盒、大鼠elisa試劑盒等各種，不過在人們的心目中，目前還是進(jìn)口ELISA試劑盒比國產(chǎn)ELISA試劑盒要好。不管是進(jìn)口的還是國產(chǎn)的ELISA試劑盒，在實驗的時候，我們都不可忽視實驗的背景影響，那么怎樣才能把試驗背景影響降低到zui低呢？要從以下幾個方面入手：
1.洗滌：看似無聊的步驟，其實是實驗的重中之重，因為如果未結(jié)合的材料殘留在微孔板中，那么它會增加背景噪音。如有必要，可增加洗滌液中的鹽濃度，這會阻止非特異結(jié)合反應(yīng)。如果背景過高，而您懷疑洗滌不夠時，可以嘗試增加洗滌次數(shù)。
2.密封：封閉液的作用是讓不相關(guān)的蛋白占據(jù)微孔板中潛在的結(jié)合位點。這就降低了可產(chǎn)生信號的抗體非特異結(jié)合的機(jī)會。您當(dāng)然也希望抗體只與目的蛋白結(jié)合吧。如果您的背景過高，懷疑封閉不充分，那么您可以嘗試使用更高濃度的封閉液，或適當(dāng)延長封閉時間。
如果您一直被背景問題所困擾，那么也許您該花些時間來優(yōu)化封閉液。這可能需要時間，但也是值得的。目前主要有兩種類型的封閉液：蛋白和非離子型去污劑。您使用的類型須取決于多個因素，包括微孔板的表面試劑、ELISA試劑盒吸附的抗原、您的抗體和檢測試劑。好的封閉液應(yīng)降低非特異性結(jié)合，但它不應(yīng)當(dāng)與抗原、抗體或檢測試劑發(fā)生相互作用。
3.抗體濃度： ELISA實驗我們通常根據(jù)平常的操作步驟，ELISA試劑盒但是如果試劑稍有不同，則可能需要優(yōu)化抗體的量。記住，非特異的抗體結(jié)合會增加背景。為了防止這一點，切勿使用過多的一抗或二抗。
4.檢測試劑：切勿使用過多的檢測試劑。如果濃度過高，或者未正確稀釋，則會導(dǎo)致高背景。也不要顯色過度，如有必要，優(yōu)化一下何時應(yīng)加入終止液。
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