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細胞的凍存步驟

閱讀：532發布時間：2015-7-2

細胞低溫凍存是培養室常規工作和通用技術。下面我們就來介紹一下細胞凍存的步驟：1.選對數增生期細胞,在凍存前1d換液。
2.按常規方法把培養細胞制備成懸液，計數，使細胞密度達5×10 ⁷ ／ml左右密度，離心，去上清。
3.加入配制好的凍存液，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養液中加入保護劑10％二甲基亞砜或甘油，可使冰點降低，使細胞內水分在凍結前透出細胞外。
4.分裝于無菌凍存管中，每管加1.5m懸液。
5.旋好凍存管并仔細檢查，一定要蓋緊，做好標記。
6.凍存：在特殊的儀器或簡易的液氮容器中，按-1℃／min的速度，在30～40min時間內，下降到液氮表面，再停30min后，直接投入液氮中。要適當掌握下降冷凍速度，過快能影響細胞內水分透出，太慢則促進冰晶形成。

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細胞的凍存步驟

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