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滴加抗體注意事項

閱讀：411發布時間：2015-9-21

在做實驗之前必須確定確定試劑盒樣本是否收集完成，樣本收集量以及保存情況，樣本是否出現溶血情況，準備實驗前是否做好序號標記情況。因為每次實驗前應列出詳細實驗計劃，其中包括實驗目的、擬用方法、所用一抗和二抗的種類和效價、預實施的操作流程方案以及預期實驗結果等。實驗分組編號用玻璃筆標記在玻片上，對每一抗體均應配以陽性和陰性對照。以下關于滴加抗體操作注意事項作出詳細講解。

切片在血清封閉后，傾去多余血清，便可滴加*抗體。滴加前取出玻片，用吸水紙拭去組織周圍的液體，組織與細胞表面的液體要用濾紙條輕輕吸掉，但注意勿使組織干燥，盡快滴加抗體工作液1滴(約50ul)于組織表面。由于切片周圍無液體，滴加的抗體成為一個液滴，這樣既可節省抗體，又可增加抗原與抗體結合的機會。如果玻片上是培養細胞，應在鏡下選擇一個理想的區域用免疫組織化學油筆在此區域外圍畫一圓圈，再滴加抗體，爾后應輕輕搖動切片數秒，以促進抗體與組織待測抗原的結合，避免假陰性小區的出現。這一操作過程雖然簡單，卻十分重要。加抗體時切忌加樣器或吸頭碰到組織或細胞，以免造成破損。

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