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豬瘟抗體實驗結果判定方法

閱讀：608發布時間：2016-6-23

中國農業大學的陳老師于五月在我公司代測豬瘟抗體、狂犬病病毒、藍耳病、白介素、干擾素等相關系列17個指標的ELISA實驗：現需發表文獻特我公司關于豬瘟抗體等實驗的詳細操作流程以及結果判定方法。我司技術做出如下詳細解答：

實驗操作方法：

1．用包被液將豬瘟弱毒單抗純化酶聯抗原、豬瘟強毒單抗純化酶聯抗原各做100倍稀釋，每孔包被100µl，4℃放置一晚上。
2．次日取出，甩去孔內液體，3×3′沖洗。
3．將待檢血清以PBS液做400倍稀釋，每孔加100µl同時將豬瘟陽性血清、豬瘟陰性血清各做100倍稀釋，于對照孔中加100μl。37℃溫育1.5h～2h。
4．重復第二步，取出，甩去孔內液體，3×3′洗滌。
5．將兔抗豬IgG酶標抗體以PBS液做100倍稀釋，每孔加100μl，37℃溫育1.5h～2h。
6．重復第4步。
7．每孔加底物溶液100µl，室溫下觀察顯色反應。當陰性對照孔稍顯色時，立即終止反應，并以陰性孔做空白對照。
8．每孔加終止液50µl立即于酶聯免疫吸附檢測儀測定490nm波長的光密度。

結果判定
1.在豬瘟弱毒酶聯板上，OD≥0.2，為豬瘟弱毒抗體陽性；OD＜0.2，為豬瘟弱毒抗體陰性。
2.在豬瘟強毒酶聯板上，OD≥0.5，為豬瘟強毒抗體陽性；OD＜0.2，為豬瘟強毒抗體陰性

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