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ELISA檢測抗多肽反應

閱讀：755發布時間：2018-8-17

檢測抗多肽反應是否發生的簡單方法就是抗多肽ELISA。有兩種技術可以將多肽鏈接到ELISA板上。

方法一、就是直接將多肽鏈接到盤上。但如果鏈接氨基酸恰好是抗原決定簇的一部分，則抗體無法和多肽進一步鏈接，這樣產生假陰性結果的可能性增加。

方法二、則是先將多肽與載體蛋白耦合，然后將多肽－蛋白耦合體鏈接到ELISA盤上。這種鏈接方法會使抗體－多肽的結合成功率提高，因為多肽不是直接嵌入盤膜，因而會更加暴露給抗體。這種方法因而更可靠，可重復性更高。需要注意的是，用于該方法的載體蛋白必須不同于用于免疫耦合的載體蛋白。這樣會避免血清中抗載體蛋白反應所導致的高背景反應。

當做血清檢測時，另一點需要記住的是，由于免疫多肽與自然多肽結構上的差別，檢測時的抗多肽反應與試劑的抗多肽反應可能是不同的。任何檢測，尤其是測定滴定量以決定收獲點時，必須包括針對天然狀態下蛋白的檢測。當然可以做針對天然狀態下蛋白的ELISA；但由于血清在不同檢測體系中表現會不一樣，因此在血清被日常使用的體系中進行蛋白識別鑒定。如果血清將用于免疫沉淀反應，就應該進行針對該反應的檢測。

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