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小鼠腫瘤壞死因子相關弱凋亡誘導因子ELISA試劑盒使用說明

閱讀:304發(fā)布時間:2017-04-26

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    上海滬宇生物科技有限公司

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本試劑盒僅供研究使用。

檢測范圍:                                                          96T

1ng/L- 70 ng/L

 

使用目的:

本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關液體樣本中腫瘤壞死因子相關弱凋亡誘導因子(TWEAK)含量。

實驗原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本小鼠腫瘤壞死因子相關弱凋亡誘導因子(TWEAK)水平。用純化的小鼠腫瘤壞死因子相關弱凋亡誘導因子(TWEAK)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入腫瘤壞死因子相關弱凋亡誘導因子(TWEAK),再與HRP標記的腫瘤壞死因子相關弱凋亡誘導因子(TWEAK)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的腫瘤壞死因子相關弱凋亡誘導因子(TWEAK)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠腫瘤壞死因子相關弱凋亡誘導因子(TWEAK)濃度。

試劑盒組成

1

30倍濃縮洗滌液

20ml×1瓶

7

終止液

6ml×1瓶

2

酶標試劑

6ml×1瓶

8

標準品(120 ng/L)

0.5ml×1瓶

3

標包被

12孔×8條

9

標準品稀釋液

1.5ml×1瓶

4

樣品稀釋液

6ml×1瓶

10

說明書

1份

5

顯色劑A液

6ml×1瓶

11

封板膜

2張  

6

顯色劑B液

6ml×1/瓶

12

密封袋

1個

標本要求 

1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但避免反復凍融

2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

 

注意事項

1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。

3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,*使用排槍加樣。

4、請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

5、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物請避光保存。

7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9.本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。

保存條件及有效期

1.試劑盒保存:;2-8

2.有效期:6個月


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