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上海滬宇生物科技有限公司
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閱讀:289發布時間:2017-4-14
甲胎蛋白(AFP)在臨床上作為肝細胞癌的診斷以及療效觀察指標已經被廣泛認可, 但是 AFP 只具有相對特異性,即肝癌患者中 AFP 升高,部分良性肝病患者中也升高,因此,尋求肝癌早期診斷特異性指標具有重要臨床意義。研究發現, AFP 在不同病理情況下產生的分子糖鏈結構不同,肝癌病理情況下主要產生與小扁豆凝集素具有強結合力的甲胎蛋白異質體(AFP-L3),本研究采用親和微量離心柱法分離 AFP-L3,應用電化學發光法對不同肝病患者總AFP 和 AFP-L3 進行檢測,探討 AFP-L3 在鑒別良惡性肝病中的應用價值。
測定方法:AFP-L3 的分離采用親和微量離心柱法, 柱內預先裝有耦聯了小扁豆凝集素的瓊脂糖,可特異性地結合AFP-L3,當血清流過離心管時,樣本中的 AFP-L3 與管內親和介質結合,經過清洗和離心洗脫過程,獲得含有 AFP-L3的樣本,然后用電化學發光法檢測總 AFP 和 AFP-L3 的含量,計算AFP-L3 占 AFP 總量的百分比,AFP-L3/AFP躍10%為陽性判斷標準。
目前肝癌的診斷主要依靠 AFP,但AFP在一些良性肝病患者中也會有不同程度的升高。因為在肝細胞再生過程中會產生一定量的AFP。
本研究結果顯示,AFP逸400滋g/L和AFP約400滋g/L 的肝癌組其總AFP-L3/AFP 陽性率明顯高于非肝癌組,差異有統計學意義,表明用本方法檢測的 AFP-L3/AFP > 10%為診斷指標時,可以有效的區分良、惡性肝病患者;而低濃度AFP陽性肝癌組與高濃度AFP 陽性肝癌組相比,其 AFP-L3 陽性率差異無統計學意義,表明AFP-L3 用于肝癌診斷不受AFP逸400 滋g /L作為肝癌診斷標準的限制,如果患者血清中總AFP 只有輕微升高,而AFP-L3 所占比例超過10%,就提示肝癌發生的可能性較大。對這樣的患者進行隨訪和嚴密監控是很有必要的。筆者同時對非肝癌患者之間 AFP-L3/AFP 陽性率進行比較,結果顯示差異均無統計學意義。
目前AFP-L3 檢測方法主要有植物凝集素親和層析法、聚丙烯酰胺凝膠電泳法、親和印跡法及親和免疫交叉電泳技術等。這些方法技術要求較高,操作繁瑣,限制了AFP-L3 在臨床的應用。本研究采用親和微量離心柱法,柱內預先裝有耦聯了小扁豆凝集素的瓊脂糖作為親和介質,然后利用半抗原糖基進行特異性洗脫,并結合離心技術,可快速簡便獲得樣本中的 AFP-L3, 然后用電化學發光法 檢測總 AFP 和AFP-L3 的含量, 方法簡單、結果準確、成本較低,適合臨床推廣應用。對于低濃度AFP陽性而AFP-L3 所占比例超過10%的肝病患者,定期復查 AFP-L3,動態觀察其變化,可及時發現某些肝病的惡變傾向,對肝癌的早期診斷意義較大。
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