拮抗凋亡轉(zhuǎn)錄因子抗體抗體規(guī)律 

（1）初次反應(yīng)產(chǎn)生抗體：當(dāng)抗原*次進(jìn)入機(jī)體時(shí)，需經(jīng)一定的潛伏期才能產(chǎn)生抗體，且抗體產(chǎn)生的量也不多，在體內(nèi)維持的時(shí)間也較短。 
（2）再次反應(yīng)產(chǎn)生抗體：當(dāng)相同抗原第二次進(jìn)入機(jī)體后，開始時(shí)，由于原有抗體中的一部分與再次進(jìn)入的抗原結(jié)合，可使原有抗體量略為降低。隨后，抗體效價(jià)迅速大量增加，可比初次反應(yīng)產(chǎn)生的多幾倍到幾十倍，在體內(nèi)留存的時(shí)間亦較長(zhǎng) 
（3）拮抗凋亡轉(zhuǎn)錄因子抗體回憶反應(yīng)產(chǎn)生抗體：由抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生的抗體，經(jīng)過(guò)一定時(shí)間后可逐漸消失。此時(shí)若再次接觸抗原，可使已消失的抗體
快速上升。如再次刺激機(jī)體的抗原與初次相同，則稱為特異性回憶反應(yīng)；若與初次反應(yīng)不同，則稱為非特異性回憶反應(yīng)。非特異性回憶反應(yīng)引起的抗體的上升是暫時(shí)性的，短時(shí)間內(nèi)即很快下降。

初次應(yīng)答:①潛伏期長(zhǎng) ②產(chǎn)生的抗體濃度低 ③在體內(nèi)持續(xù)時(shí)間短 ④抗體與抗原的親和力低，以IgM為主。
再次應(yīng)答:①潛伏期短，一般為1~3天，血液中即出現(xiàn)抗體 ②產(chǎn)生的抗體濃度高 ③在體內(nèi)持續(xù)時(shí)間長(zhǎng) ④抗體與抗原的親和力高，以IgG為主。

【抗體的異質(zhì)性。抗體的組成極為復(fù)雜，*受體5(SSTR5)抗體是由成千上萬(wàn)、多種多樣的免疫球蛋白（Ig）分子所組成。這些Ig分子在形狀、大小、結(jié)構(gòu)以及氨基酸的組成和排列上，既相似，又有差別。由于有差別，它們的電泳活性就有很大的變化。】

步法：EnVision System
EnVision顯色系統(tǒng)是將二抗和酶通過(guò)一個(gè)多聚葡聚糖骨架聯(lián)接成一個(gè)多聚體（即EnVision）直接放大信號(hào)40-50倍，把傳統(tǒng)的二抗、三抗分別孵育合為一次孵育。特點(diǎn)：敏感、省時(shí)、方便、背景低。

廠家供應(yīng)，價(jià)格說(shuō)明書，誠(chéng)凜生物給您提供zui完善的與服務(wù)！
■中文名稱：
■英文名稱：Anti-AATF（Apoptosis-antagonizing transcription factor）
■產(chǎn)品貨號(hào)：CL-1229T
■產(chǎn)品規(guī)格：0.1ml/100ug  0.2ml/200ug
■濃度說(shuō)明：1mg/1ml
■保存條件:Store at -20 °C
■產(chǎn)品品牌：Abcam、santa、上海誠(chéng)凜生物
■產(chǎn)品性狀：凍干粉或液體
■克隆性：多克隆、單克隆
■來(lái)源物種：兔、小鼠、羊、大鼠
■交叉反應(yīng):Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Guinea Pig
■產(chǎn)品應(yīng)用：WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-508

上海誠(chéng)凜生物公司其它*產(chǎn)品：

人抗肝細(xì)胞膜抗體(LMA)ELISA Kit酵素免疫分析法【48次/300次（T）】《代測(cè)》
人抗肝細(xì)胞胞質(zhì)1型抗體(LC1)ELISA Kit 酵素免疫分析法【48次/301次（T）】《代測(cè)》
人抗淋巴細(xì)胞球蛋白(ALG)ELISA Kit 酵素免疫分析法【48次/302次（T）】《代測(cè)》
人抗淋巴細(xì)胞毒抗體(ALA/LCA)ELISA Kit 酵素免疫分析法【48次/303次（T）】《代測(cè)》
人抗巨噬細(xì)胞抗體(anti-macrophage Ab)ELISA Kit 酵素免疫分析法【48次/304次（T）】《代測(cè)》
人抗麻疹病毒抗體(MVAb)ELISA Kit酵素免疫分析法【48次/305次（T）】《代測(cè)》
人抗Mi2抗體(anti-Mi2-Ab)ELISA Kit 酵素免疫分析法【48次/306次（T）】《代測(cè)》
人抗單核細(xì)胞抗體(AMA)ELISA Kit酵素免疫分析法【48次/307次（T）】《代測(cè)》
人抗鼠抗體(HAMA)ELISA Kit 酵素免疫分析法【48次/308次（T）】《代測(cè)》
人抗鼠抗體(HAMA)ELISA Kit 酵素免疫分析法【48次/309次（T）】《代測(cè)》
人抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體(MCV)ELISA Kit 酵素免疫分析法【48次/310次（T）】《代測(cè)》
人抗髓磷脂抗體IgA(AMA IgA)ELISA Kit 酵素免疫分析法【48次/311次（T）】《代測(cè)》
人抗髓磷脂抗體IgA(AMA IgA)ELISA Kit 酵素免疫分析法【48次/312次（T）】《代測(cè)》
人抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體(MCV)ELISA Kit 酵素免疫分析法【48次/313次（T）】《代測(cè)》
人抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體(MAG Ab)ELISA Kit 酵素免疫分析法【48次/314次（T）】《代測(cè)》
人抗心肌抗體(AMA)ELISA Kit酵素免疫分析法【48次/315次（T）】《代測(cè)》
人抗中性粒細(xì)胞抗體(ANA)ELISA Kit 酵素免疫分析法【48次/316次（T）】《代測(cè)》
人抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體(cANCA)ELISA Kit酵素免疫分析法【48次/317次（T）】《代測(cè)》
人抗中性粒細(xì)胞顆粒抗體(ANGA)ELISA Kit酵素免疫分析法【48次/318次（T）】《代測(cè)》
■免疫組化和Western Blot可以用同一種抗體嗎？
解答：免疫組化時(shí)抗體識(shí)別的是未經(jīng)變性處理的抗原決定簇（又稱表位），有些表位是線性的，而有的屬于構(gòu)象型；線性表位不受蛋白變性的影響，天然蛋白和煮后的蛋白都含有；構(gòu)象型表位由于受蛋白空間結(jié)構(gòu)限制，煮后變性會(huì)消失。如果你所用的抗體識(shí)別的是蛋白上連續(xù)的幾個(gè)氨基酸，也就是線性表位，那么這種抗體可同時(shí)用于免疫組化和Western，而如果抗體識(shí)別構(gòu)象形表位，則只能用于免疫組化。一般抗體說(shuō)明書上都有注明此種抗體識(shí)別的氨基酸區(qū)間。（限于單抗）
■Western Blot 中抗體的重復(fù)應(yīng)用問(wèn)題
解答：抗體工作溶液一般不主張儲(chǔ)存反復(fù)使用，但是如抗體比較珍貴，可反復(fù)使用2－3次。稀釋后應(yīng)在2－3天內(nèi)使用，4℃保存，避免反復(fù)凍融。

【多克隆抗體的制備】
⒈ 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
成年兔。
⒉ 實(shí)驗(yàn)器材
特制兔盒；刀片；25G針頭；1ml注射器；20 ml 血液收集管；藥鏟；離心機(jī)以及塑料離心管；加樣器及加樣管；燒杯。
⒊ 實(shí)驗(yàn)試劑
⑴ 抗原；乙醇；20mM 磷酸緩沖溶液pH7.2。
⑵ 福氏*佐劑和福氏不*佐劑
（實(shí)驗(yàn)方法）
⒈ 抗原的制備
抗原制備的主要目的在于在免疫動(dòng)物體內(nèi)產(chǎn)生zui強(qiáng)、zui適當(dāng)?shù)目贵w。由于純化的抗原適合產(chǎn)生抗體，因此在注射前通常采用一些經(jīng)典的方法，比如柱層析、分級(jí)萃取、亞細(xì)胞分離等進(jìn)行抗原的分離和純化。如果多肽抗原在SDS/PAGE中為可見(jiàn)的單一帶，抗原從凝膠中的抽提可作為純化的zui后一個(gè)步驟。
⒉ 預(yù)放血
輕輕的將兔子放在特制兔盒中，處于放松狀態(tài)的兔子采血會(huì)較容易。按壓兔子耳根部直至血管突出,然后將針頭插入耳部血管的中上部，觀察到進(jìn)針后小心推出活塞收集血液1ml -5ml。結(jié)束收集后，退出針頭并按壓傷處以制止血流，再用乙醇消毒。取收集的血液在37°C恒溫箱中放置30分鐘以防止激活補(bǔ)體系統(tǒng)，再將試管在4°C放置過(guò)夜使血液凝固。用藥鏟將血凝塊從管壁上撥落，將血液轉(zhuǎn)移至塑料離心管中，4°C，10,000g離心10分鐘，收集上清液在4°C保存。
⒊ 注射抗原
⑴ 準(zhǔn)備兩只成年兔，將100µg抗原/兔溶入1ml磷酸緩沖溶液中待用。在1ml福氏不*佐劑中加入分枝桿菌制成*佐劑，并加入1ml抗原溶液，劇烈震蕩使之充分乳化，用3ml注射器抽取該乳化液，接上25G針頭，排除注射器中的氣泡。從籠中取出兔子放在平坦處，在4個(gè)不同的部位進(jìn)行皮下注射，兩處在后背，兩處在大腿處。撫去注射處的兔毛并用乙醇消毒暴露的皮膚。捏出皮膚，將針頭以相對(duì)皮膚15度的角度進(jìn)針，進(jìn)針深度為1cm-2cm，小心不要刺入肌肉中，在4個(gè)不同部位分別各注射約500µl抗原溶液。注射結(jié)束后，將針在注射處放置幾秒鐘后再輕輕拔出，并用乙醇在注射處消毒。在4個(gè)部位重復(fù)上述操作。用相同方法免疫另一只家兔。
⑵ 每4-6周注射抗原，并在注射后的7天-10天按照步驟2收集血液。將收集的血液與注射前收集的血液進(jìn)行比較，檢查是否有抗體產(chǎn)生。待確定產(chǎn)生抗體后可大量收集血液，但每只兔子收集血液不能多于40ml以防止休克。
⒋ 收集血液
⑴ 將家兔輕輕放入固定架上,二甲苯涂于耳部血管的上中部，用刀片傾斜45°在該處切出0.23cm-0.3cm的切口使血液能自由的流出。用消毒后的管收集滴出的血液，若在結(jié)束之前出現(xiàn)凝固可用溫水輕擦切口處，再繼續(xù)收集。收集適量血液后可用消毒后的紗布輕擦患處，輕按患處10秒-20秒確定血流停止后方可結(jié)束。
⑵ 將血液在37°C恒溫箱中放置30分鐘，再在4°C放置過(guò)夜。用藥鏟將血凝塊從管壁上撥落，將血液轉(zhuǎn)移至塑料離心管中，4°C，10,000g離心10分鐘，收集上清液即為抗血清，可在-20°C保存數(shù)年。
（實(shí)驗(yàn)結(jié)果）
利用蛋白質(zhì)免疫印跡法或免疫電泳方法檢查抗體產(chǎn)生情況。

【單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)與局限性】：?jiǎn)慰寺】贵w和多克隆抗體各有其優(yōu)點(diǎn)和局限性，只有對(duì)它們有全面的了解，才能根據(jù)不同應(yīng)用領(lǐng)域的要求，正確的選擇和應(yīng)用。
 1.單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)： （1）雜交瘤可以在體外“*”地存活并傳代，只要不發(fā)生細(xì)胞株的基因突變，就可以不斷的生產(chǎn)高特異性、高均一性的抗體。 （2）可以用相對(duì)不純的抗原，獲得大量高度特異的、均一的抗體。 （3）由于可能得到“無(wú)*”的均一性抗體，所以適用于以標(biāo)記抗體為特點(diǎn)的免疫學(xué)分析方法，如IRMA和ELISA等。 （4）由于單克隆抗體的高特異性和單一生物學(xué)功能，可用于體內(nèi)的放射免疫顯像和免疫導(dǎo)向治療。
 2.單克隆抗體的局限性： （1）單克隆抗體固定的親和性和局限的生物活性限制了它的應(yīng)用范圍。由于單克隆抗體不能進(jìn)行沉淀和凝集反應(yīng)，所以很多檢測(cè)方法不能用單克隆抗體完成。（2）單克隆抗體的反應(yīng)強(qiáng)度不如多克隆抗體。 （11）制備技術(shù)復(fù)雜，而且費(fèi)時(shí)費(fèi)工，所以單克隆抗體的價(jià)格也較高。
單抗：識(shí)別單個(gè)抗原表位，所以特異性高。但如果所識(shí)別的抗原表位被破壞，則會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，這也是單抗的缺點(diǎn)之一；   
多抗：雖然存在交叉反應(yīng)的問(wèn)題，但由于識(shí)別多個(gè)抗原表位，所以即使有少數(shù)幾個(gè)抗原表位被破壞，仍然不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，這是多抗的優(yōu)點(diǎn)之一。  
二者各有利弊,一般說(shuō)來(lái)只要說(shuō)明書上標(biāo)明可以做組化就都可以。  
專門用于免疫組化的抗體多為IgG類單抗，識(shí)別抗原的空間構(gòu)象。需要結(jié)合是否同時(shí)做WESTERN或熒光或沉淀等做綜合的選擇。單抗多是鼠源，種植在腹腔的雜交瘤細(xì)胞，通過(guò)腹水獲得；多抗是兔羊源，通過(guò)免疫動(dòng)物，從血清中獲得。