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卡邁舒(上海)生物科技有限公司
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英文名稱:Human non-neuronal enolase,NNE ELISA Kit
規格:48T/孔、96T/孔,可提供定量與定性.
種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
運輸:現貨供應,通常為快遞運輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠地方三至五天時間到貨。
標本要求
1.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
2.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
人非神經元性烯醇化酶(NNE)ELISA試劑盒操作步驟
1. 編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照(不加樣品、*標記的抗-IgG抗體、鏈霉親和素-HRP)1孔
2. 加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,37℃溫育45分鐘。
3. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
4. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復4次,拍干。
5. 加*標記的抗-IgG抗體:每孔加入*標記的抗-IgG抗體50μl(空白孔除外)。37℃溫育30分鐘
6. 洗滌:操作同4。
7. 加鏈霉親和素-HRP:每孔加入50μl的鏈酶親和素-HRP(空白孔除外),輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
8. 洗滌:操作同4。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A 50μl,再加入顯色劑B 50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
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