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快速藥物敏感性測試(AST&DST)-Anopore氧化鋁膜

時間:2017/1/6閱讀:1743
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Whatman Anopore氧化鋁膜
用于快速藥物敏感性測試(AST&DST)

前言

藥物敏感性試驗(DST)常用于了解病原微生物對各種抗生素的敏感程度或耐受程度來指導臨床用藥。微生物生長在許多診斷過程中的收到速率的限值。然而分子方法僅在某些情況下能實施,基于培養基的方法仍然占據主流,運用Anopore氧化鋁膜來實現藥物敏感性實驗可基于微生物成像更快速的表型。致病微生物氧化鋁膜上較其他任何方式的生長而不易受限制,大大縮短了培養時間,且可以原位觀察致病微生物在同藥物作用時生長變化,即輕松實現致病微生物在氧化鋁膜上的培養、殺死、染色和原位成像等連續步驟。

操作步驟

1.孔徑為200nm的氧化鋁膜(Anopore)滅菌后置于適合的瓊脂平板上,通常為含有某待測抗生素的

Mueller-Hinton或Sabouraud培養基;

2.氧化鋁膜上注射待試驗的細菌或真菌,并置于CO2培養箱中37°C環境(40min至幾個小時);

3.接下來用熒光染料對附著在氧化鋁膜上的細胞進行染色,真菌用Fun-1染色,細菌用Syto 9染色,染色過程通過氧化鋁膜中貫穿的納米孔進行;

4.染色的微生物群直接用Olympus BX41落射熒光顯微鏡成像。

結論

多孔陶瓷膜Anopore做抗生素敏感性試驗(AST)對染色和原位成像極其有利,明顯加快了檢測速度,

特別檢測生長速率緩慢的真菌和結核桿菌

訂貨信息

貨號

名稱/孔徑

尺寸mm

數量

6809-7023

Anodisc 13, 200nm

∅13

100

6809-6022

Anodisc 25, 200nm

∅25

50

6809-5522

Anodisc 47, 200nm

∅47

50

注: 白色念球菌在 Anopore 表面可在 60min 內觀察 到生長,毛癬菌則在 6h 后觀察 到生長,產氣腸桿菌在 25min 內觀察 到生長 , 等等, 檢測 MIC 值都與 E 試驗法相當,且檢測時間更短。通過氧化鋁膜 Anopore 方法,耐 5/5 和 19/19 *氧下二胺嘧啶敏感的菌種均被測試,卻要比常規的培養基方法快 8 個小時。

下表為傳統方法與 Anopore 方法的對照:

??

參考文獻 C. Ingham, M. de Lange, M. van den Ende, P.C. Wever, P.M. Schneeberger Jeroen Bosch Ziekenhuis, ‘s - Hertogenbosch, the Netherlan . The culture and antibiotic sensitivity testing (AS T) of pathogenic microorganisms on a highly porous ceramic (Anopore)

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