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單克隆抗體技術(shù):細胞的選擇

時間:2017/7/18閱讀:835
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單克隆抗體技術(shù):細胞的選擇

脾細胞 
1.材料 
(1) 免疫過的血清抗體滴度高的Balb/c鼠。 
(2) 1640培養(yǎng)液 
(3) 2.5%FCS-1640營養(yǎng)液 
2.操作方法 
(1) 拉頸或用CO2處死小白鼠。 
(2) 將小鼠放于70%酒精中浸泡消毒,取出固定于板上,在無菌條件下取脾。 
(3) 把脾放入5ml含有2.5%FCS的1640液中,冰浴下輕輕洗去脾上的紅血球。 
(4) 用鑷子輕輕擠壓脾,做成脾細胞懸液,用毛細管將懸液移入小試管中。 
(5) 直立小試管3min,使大塊的結(jié)締組織下沉,把細胞懸液移入離心管中。 
(6) 以2.5%FCS—1640充滿離心管,并以400g離心7min~10min(與此同時應(yīng)開始制備骨髓細胞)。 

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