細胞系（株）培養客戶須知

（1）請客戶收到小鼠黑色素瘤細胞 B16-F0-EGFP細胞株產品后，立即對外包裝，細胞凍存管，細胞培養瓶等拍照，如有疑問或問題，須在24小時內通知上海信裕生物科技有限公司，提供照片和書面說明

（2.）請客戶在收到復蘇細胞后，迅速將原裝的細胞瓶放入細胞培養箱內靜置，3-4小時后，再使用傳代（注：請客戶觀看細胞狀態后。如若細胞已經長滿且貼壁好，也可靜止4小時左右后就傳代

（3.）請使用新配制的培養體系

（4.）請客戶培養細胞前三天，須對細胞生長狀態進行拍照和注明時間，若細胞生長存在質量問題，須向上海本公司提供小鼠黑色素瘤細胞 B16-F0-EGFP細胞培養生長的照片和書面說明。

（5.）請客戶仔細閱讀細胞說明書，提前準備好相應的培養體系，避免造成細胞質量問題

注：（1），觀察細胞在低倍鏡（4或5X物鏡）下進行，否則不能準確判斷細胞的傳代密度。看細胞的形態請在10X或20X物鏡下。

(2)，瓶中運輸培養基不能重復再用，請換用加雙抗或無雙抗的新培養基，細胞凍存后，培養基中可不加任何抗生素。

(3)，有些細胞貼壁不牢，如發現貼壁細胞脫落，可離心吹打后接種到新瓶內。

常見問題及解決方案

1、培養瓶有破裂，培養液有漏液：極大可能會污染，所以我們會及時安排幫老師解決。  2、細胞漂浮：培養瓶不開封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養箱。次日觀察，如細胞大部分又貼回瓶底，表明細胞活力正常，剩余漂浮的細胞可以去掉，留 10ml 培養液培養觀察，細胞生長至匯合度 80%，進行消化傳代；如細胞還是不貼壁，將細胞離心收集轉到新培養瓶，原培養瓶加部分培養液繼續培養，中間注意觀察，我們的技術人員會一直跟蹤指導，直到問題解決。

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