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人透明質酸酶(HAase)檢測試劑盒價格雙抗體夾心法是檢測抗原zui常用的方法,操作步驟如下:
1) 將特異性抗體與固相載體聯結,形成固相抗體。洗滌除去未結合的抗體及雜質。
2) 加受檢標本,保溫反應。標本中的抗原與固相抗體結合,形成固相抗原抗體復合物。洗滌除去其他未結合物質。
3) 加酶標抗體,保溫反應。固相免疫復合物上的抗原與酶標抗體結合。*洗滌未結合的酶標抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢抗原的量相關。
4) 加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產物。通過比色,測知標本中抗原的量。在臨床檢驗中,此法適用于檢驗各種蛋白質等大分子抗原,例如HBsAg、HBeAg、AFP、hCG等。只要獲得針對受檢抗原的異性抗體,就可用于包被固相載體和制備酶結合物而建立此法。如抗體的來源為抗血清,包被和酶標用的抗體分別取自不同種屬的動物。如應用單克隆抗體,一般選擇兩個針對抗原上不同決定簇的單抗,分別用于包被固相載體和制備酶結合物。這種雙位點夾心法具有很高的特異性,而且可以將受檢標本和酶標抗體一起保溫反應,作一步檢測。
固相載體
固相載體在人透明質酸酶(HAase)檢測試劑盒價格測定過程中作為吸附劑和容器,不參與化學反應。可作ELISA 中載體的材料很多,zui常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有較強的吸附蛋白質的性能,抗體或蛋白質抗原吸附其上后仍保留原來的免疫學活性,加之它的價格低廉,所以被普遍采用。
聚苯乙烯為塑料,可制成各種形式。ELISA 載體的形狀主要有三種:微量滴定板、小珠和小試管。以微量滴定板zui為常用,于EILSA的產品稱為ELISA板,上標準的微量滴定板為8×12 的96 孔式。為便于作少量標本的檢測,有制成8聯孔條或12聯孔條的,放入座架后,大小與標準ELISA 板相同。ELISA 板的特點是可以同時進行大量標本的檢測,并可在特制的比色計上迅速讀出結果。現在已有多種自動化儀器用于微量滴定板型的ELISA 檢測,包括加樣、洗滌、保溫、比色等步驟,對操作的標準化極為有利。聚苯乙烯經射線照射后,其吸附性能特別是對免疫球蛋白的吸附性能增加,應用于雙抗體夾心法可使固相上抗體量增多,但用于間接法測抗體時空白值較大。
良好的人透明質酸酶(HAase)檢測試劑盒價格板應該是吸附性能好,空白值低,孔底透明度高,各板之間、同一板各孔之間、同一板各孔之間性能相近。聚苯乙烯ELISA板由于原料的不同和制作工藝的差別,各種產品的質量差異很大,因此,每一批號的ELISA板在使用前須事先檢查其性能。常用的檢查方法為:以一定濃度的人IgG(一般為10ng/ml)包被ELISA板各孔,洗滌后每孔內加入適當稀釋度的酶標抗人IgG 抗體,保溫后洗滌,加底物顯色,終止酶反應后,分別測每孔溶液的吸光度。控制反應條件,使各孔讀數在吸光度0.8左右。計算全部讀數的平均值。所有單個讀數與全部讀數的均數之差,應小于10%。
與聚苯乙烯類似的塑料是聚氯乙烯。作為ELISA 固相載體,聚氯乙烯的特點為質軟板薄,可剪割,價廉,但光潔度不如聚苯乙烯板,孔底亦不如聚苯乙烯平整。聚氯乙烯對蛋白質的吸附性能比聚苯乙烯高,但空白值也略高。為比較不同固相在某一ELISA測定中的優劣,可應用如下的試驗:用其他免疫學測定方法選出一個典型的陽性標本和陰性標本,將它們進行一系列稀釋后,在不同的固相載體上按預定的ELISA操作步驟進行測定,然后比較結果。在哪一種載體上陽性結果與陰性結果差別zui大,這種載體就是這一ELISA測定項目的zui合適的固相載體。
在人透明質酸酶(HAase)檢測試劑盒價格ELISA中,用作固相載體的小珠一般為直徑0.6cm的圓珠,表面經磨砂處理后吸附面積大大增加。ELISA板孔的吸附面積約為200mm2,小珠均為1000mm2,將近ELISA板孔的5倍。吸附面積的增大即意味著固相抗原或抗體量的增加。再者,球型小珠的表面弧度更有利于吸附的抗原決定簇或抗體結合位點的暴露面處于*反應狀態,因此珠式人透明質酸酶(HAase)檢測試劑盒價格的反應往往更為靈敏。小珠的另一特點是更易于使洗滌*,使用特殊的洗滌器,使小珠在洗滌過程中滾動淋洗,其洗滌效果遠較板孔的浸泡式為好。但由于磨砂工藝的難度較大,小珠的均一性較差。小試管作為固相載體也有較大的吸附表面,而且標本的反應量也相應增加。板式及珠式ELISA的標本量一般為100-200ul,而小試管可根據需要加大反應體積,標本反應量的增加有助于試驗敏感性的提高。小試管還可以當作比色杯,zui后直接放入分光光度計中比色。
也有應用聚苯乙烯膠乳或其他材料制成的微粒作為ELISA固相載體的。其優點是表面積極大,反應在懸液中進行,其速率與液相反應近似。以含鐵的磁性微粒作為ELISA固相載體,反應后用磁鐵的吸引進行分離,洗滌方便,試劑盒一般均配以特殊儀器。
人透明質酸酶(HAase)檢測試劑盒價格相關產品如下:hz-3095E 小鼠鈣通道阻滯劑(CCB)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-3096E 小鼠丙氨酸轉氨酶/谷丙轉氨酶(ALT/GPT)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-3097E 小鼠骨形成蛋白(BMPs)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-3098E 小鼠視黃醇結合蛋白4(RBP-4)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-3099E 小鼠6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-3100E 小鼠戊糖素(Pentosidine)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-3101E 小鼠晚期糖基化終末產物(AGEs)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-3102E 小鼠中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白(NGAL)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-3103E 小鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-3104E 小鼠多巴胺D1受體(D1R)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-3105E 小鼠腎上腺素能a1A受體(ADRA1A)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-3106E 小鼠鈣結合蛋白(CR)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-3107E 小鼠透明質酸結合蛋白(HABP)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-3108E 小鼠嗜環蛋白/親環素A(CyPA)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-3109E 小鼠骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-3110E 小鼠淋巴細胞因子ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-3111E 小鼠抗利尿激素/血管加壓素/精氨酸加壓素(ADH/VP/AVP)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-3112E 小鼠N-乙酰基-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨酸(AcSDKP)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-3113E 小鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-3114E 小鼠纖連蛋白(FN)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-3115E 小鼠FMS樣酪氨酸激酶3(Flt3)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-3116E 小鼠胰島素樣生長因子結合蛋白1(IGFBP-1)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-3117E 小鼠胰島素樣生長因子結合蛋白2(IGFBP-2)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-3118E 小鼠白介素16(IL-16)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-3119E 小鼠白介素3(IL-3)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-3120E 小鼠白介素4(IL-4)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-3121E 小鼠白介素-5(IL-5)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-3122E 大鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-3123E 小鼠層連蛋白/板層素(LN)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-3124E 小鼠巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-3125E 小鼠巨噬細胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-3126E 小鼠正常T細胞表達和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-3127E 小鼠巨噬細胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-3128E 小鼠催產素(OT)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-3129E 7 血清/組織/尿液
hz-3130E 小鼠Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-3131E 小鼠5核苷酸酶(5-NT)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-3132E 小鼠神經生長因子(NGF)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-3133E 小鼠神經營養因子3(NT-3)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-3134E 小鼠神經營養因子4(NT-4)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-3135E 小鼠骨保護素(OPG)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-3136E 小鼠B因子(BF)ELISA kit 血清/組織/尿液
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