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吖啶橙染色試劑盒-齊一生物

時(shí)間:2019/12/12閱讀:337
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吖啶橙(AO)是一種選擇性熒光陽(yáng)離子染料,它能透過細(xì)胞膜,活細(xì)胞與死細(xì)胞均能被其染色。吖啶橙常用于熒光顯微鏡和流式細(xì)胞儀技術(shù)中細(xì)胞生理學(xué)與細(xì)胞周期的分析,該細(xì)胞滲透型染色液可與其他很多染色液及方法聯(lián)合使用。

在熒光顯微鏡下觀察,吖啶橙可透過完整細(xì)胞膜,將活細(xì)胞的細(xì)胞核染成均勻的綠色熒光;而凋亡細(xì)胞由于其染色質(zhì)固縮或斷裂為大小不等的片段,吖啶橙將細(xì)胞核染成黃綠色亮綠色熒光;死亡細(xì)胞呈橙色熒光,但熒光很弱甚至?xí)А?/span>

試劑盒組成

成分

100 次

200 次

組分 A:AO 染色液

0.5 mL

1 mL

組分 B:10×緩沖液

10 mL

20 mL

說明書

1

1

儲(chǔ)存條件

2-8°C 避光保存,有效期為 12 個(gè)月。

操作步驟

注意:以下操作適用于大多數(shù)細(xì)胞類型

1. 使用前請(qǐng)將小瓶離心。

2. 使用前將 10×緩沖液(組分 B)用雙蒸水稀釋成 緩沖液。

3. PBS 洗滌細(xì)胞兩次后,用適量的 緩沖液重懸細(xì)胞調(diào)整細(xì)胞濃度為 106 個(gè)/mL

注意:貼壁細(xì)胞可以在蓋玻片上或細(xì)胞培養(yǎng)孔中原位染色。 在某些必要情況下,可使用 TritonX-100 進(jìn)行細(xì)胞通透。

4. 95 μL 細(xì)胞懸液,加入 5 μL AO 染色液,輕柔混勻。

5. 室溫避光孵育 1-5 分鐘。

注意:較好的染色濃度及培養(yǎng)時(shí)間,根據(jù)細(xì)胞的不同而不同。

6. 10 μL 混合液,滴加在一個(gè)干凈的載玻片上,并加蓋蓋玻片。

7. 在熒光顯微鏡下檢測(cè) Ex / Em = 488 / 1515nm 處的細(xì)胞。

警告!

使用前,請(qǐng)仔細(xì)閱讀說明書,為了您的安全,請(qǐng)佩戴手套,護(hù)目鏡,或是其他保護(hù)措施。

本試劑盒僅用于研發(fā),不可藥用,家庭或其他。

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