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中性、堿性土壤*磷試劑盒說明書-齊一生物試劑盒

時間:2021/3/9閱讀:580
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中性、堿性土壤*磷試劑盒說明書齊一生物

For Research Use only

僅供研究用

貨號:QYS-236035

微量法 100管/96樣

注意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定

中性、堿性土壤*磷試劑盒說明書齊一生物測定意義

*磷是土壤中可被植物吸收的磷組分,包括全部水溶性磷、部分吸附態磷及有機態磷,土

壤中*磷是限制植物生長主要因子之一。

測定原理

用弱堿法提取酸溶性磷和吸附態磷,鉬藍與磷酸根生成 660nm 有特征吸收峰的物質,通過測定660nm 光吸收,即可計算磷含量

自備實驗用品及儀器

天平、常溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96 孔板、震蕩儀。

試劑組成和配制

提取液:液體 125mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:粉劑×1 瓶,4℃避光保存。臨用前加入 5mL 雙蒸水,溶解后 4℃保存一周。

試劑二:粉劑×1 瓶,4℃避光保存。臨用前加入 5mL 雙蒸水,溶解后 4℃保存一周。

試劑三:液體 5mL×1 瓶,室溫保存。

標準品:10μmol/mL 標準磷貯備液 1mL×1 支,4℃保存。工作液:35mL 棕色空瓶×1 瓶。

工作液(定磷劑)的配制:按 H2O:試劑一:試劑二:試劑三=2:1:1:1 的比例配制,配好的工作液應為淺黃色。若變色則試劑失效,若是藍色則為磷污染,工作液應現配現用。

注意:配試劑用新的燒杯、玻璃棒和玻璃移液器,也可以用一次性塑料器皿,避免磷污染。

樣本處理

新鮮土樣風干,過 30-50 目篩,按照土壤質量g:提取液體積(mL) 120 的比例建議

稱取約 0.05g 土樣,加入 1mL 提取液,振蕩提取 1h10000g  25℃離心 10min,取上清液待測。

中性、堿性土壤*磷試劑盒說明書齊一生物測定步驟

1 測定步驟:

1、 分光光度計/酶標儀預熱 30min 以上,調節波長至 660nm,蒸餾水調零。

2、 將 10μmol/mL 標準液用提取液稀釋為 6、4、2、1、0.5、0.25μmol/mL 的標準溶液備用。

3、 操作表:(在 1.5mL 離心管中或 96 孔板依次加入下列試劑)

 

測定管

標準管

空白管

樣品(µL)

20

-

-

標準溶液(µL)

-

20

-

提取液(µL)

40

40

60

工作液(µL)

80

80

80

H2O(µL)

60

60

60

充分混勻,25℃靜置 30min,將液體置于微量玻璃比色皿/96 孔板中,測定 660nm處吸光值 A,分別記為 A 測定管、A 標準管和 A 空白管,△A=A 測定管-A 空白管,△A 標準=A 標準管-A 空白管,空白管只需測一次。

 

計算公式

1、 標準曲線的繪制:

以各個標準溶液的濃度為 x 軸,其對應的△A 標準為 y 軸,繪制標準曲線,得到標準方程 y=kx+b, 將△A 帶入方程得到 x(μmol/mL)

2、 *磷含量的計算:

*磷含量(μmol /g 鮮重)=x×V 樣÷(V 樣×W÷V 樣總)=x÷W。

V 樣:加入樣本體積,0.02mL;V 樣總:加入提取液體積,1mL;W:樣本質量,g。

注意事項

1. 配好的顯色液當天用完,變藍則不能使用。

2. 低檢出限為 0.2μg/mL

中性、堿性土壤*磷試劑盒說明書齊一生物注:電子版說明書僅供參考、詳情請參考試劑盒紙質版說明書。

 

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