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促黃體生成激素放免試劑盒操作步驟

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促黃體生成激素放免試劑盒操作步驟【成份】

藥盒組成及配制 50 100 200

1.[125I]-LH() 1 1 2

2.LH校準品 1 1 1

LH校準品(7/)濃度分別為:(05102550100200)mIU/mL

3.LH抗體() 1 1 2

4.質量控制樣品 1 1 1

5.分離試劑 1 1 2

6.藥盒使用說明書 1 1 1

促黃體生成激素放免試劑盒操作步驟操作方法

1.樣品采集:取血,分離血清,備用。(28)℃放置可保存2周;若冰凍保存,可放置五周。脂血或溶血樣品影響測定結果。

2.實驗方法:試管編號,按下表程序操作。

操作表 單位:μL

管別

校準品

樣品

蒸餾水

抗體

125I-LH

混勻,室溫放置(1216)小時。

分離劑

T

--

--

--

--

100

--

NSB

200(S0)

--

100

--

100

500

S0

100

--

--

100

100

500

S1管~S

100

--

--

100

100

500

血樣品管

--

100

--

100

100

500

混勻,室溫放置15分鐘,離心(3500/)15分鐘,吸棄上清液,在放免儀上測定各管沉淀的放射性計數(cpm)

數據處理

1.計算機處理:建議采用“對數計量-相對結合率的分數對數”〔log(dose)logit(Bi/B0)〕數學模型或四參數數學模型擬合。

2.計算、繪圖法:

計算各管的百分結合率:以S0(cpm)B0,各校準管Si(cpm)Bi,求各管的百分結合率。

 

.線性回歸:用logXlogitY回歸,求出rab值,樣品含量可由下式計算得出。

 

.繪圖法:用各校準點計算的結果,在loglogit坐標紙上繪制校準曲線圖,被測樣品的含量可根據Bi/B0的百分結合率從校準曲線圖上查出。

正常參考值

各實驗室應根據實驗模型建立自己的動物參考

技術特性

1.靈敏度:<0.3mIU/mL

2.測定范圍:(5200)mIU/mL

3.精密性:批內變異系數CVw10%,批間變異系數CVb15%。

參考文獻

1.Bremnerw J:PituifaryPonadotropinsans their dosorders,Principles of endocinodosy and metabolism KL 1990,pp152-6.

2.Wu CH:Monitoring of oradation induction Fertilsteril 30:617,1978.

【性狀】

液體組份應澄清,無沉淀或絮狀物。

【放射性核素半衰期】

放射性核素碘[125I]半衰期(T1/2)=60

促黃體生成激素放免試劑盒操作步驟【適應癥】

測定原理

本藥盒是利用放射免疫分析方法進行測定的。在均相競爭抑制反應中采用平衡法,對血清樣品中LH的含量進行直接測定。測定中校準品、樣品等中的LH125I-LH競爭*的LH抗體結合位。當被測樣品中LH的含量高時,剩余的抗體結合位就少,從而與抗體結合的125I-LH就少,反之亦然。利用分離試劑分離出抗原-抗體復合物,并測定復合物中的放射性計數。125I-LH的結合量與樣品中LH的含量呈函數關系,通過數據處理可求出樣品中LH的含量。

臨床意義

促黃體生長激素(LH)是由垂體前葉分泌的糖蛋白激素,其分子量大約為30000,由兩條多肽鏈(即α和β亞單位)組成。LHα亞單位與FSHLH和HCG的亞單位的結構相似。β亞單位在上述激素之間是不同的,從而賦予各激素各自的生物及免疫學特性。在雌性體中,LH在卵泡期限與FSH一起促進卵泡的成熟、雌性激素的合成和分泌;促進排卵和使排卵后的卵泡轉變為黃體;促進間質的生長;并促進黃體合成和孕激素與雌性激素的分泌。雄性LH促進睪丸間質細胞增生,促進其合成和分泌睪丸酮。由于LHFSH的作用是互相協同的故二者常同時測定。LH增高見于Klinefelter綜合癥、Turner綜合癥、性腺切除后及促性腺激素產生腫瘤;減低見于西蒙氏病、席漢氏綜合癥、肥胖性生殖器退化綜合癥、垂體性侏儒、睪丸腫瘤、卵巢腫瘤、神經性厭食及使用雌激素后。

 

【注意事項】

1.所有試劑包括待測樣品實驗前應事先在室溫下平衡20分鐘,且使用前應充分搖勻。

2.不同批試劑不能混合使用,每份樣品都應做雙管實驗。

3.本實驗使用放射性核素碘[125I](劑量為0.2μCi/mL),故應注意放射防護。放射性廢物須按放射防護條例規定處理。

齊一生物以上資料供參考,如有疑問歡迎

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