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人抗中性粒/中心體抗體(ACA)elisa試劑盒

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更新時間:2018-05-14 09:00:00瀏覽次數(shù):284次

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本公司的人抗中性粒/中心體抗體(ACA)elisa試劑盒 ,專注于ELISA相關(guān)產(chǎn)品的研發(fā)和生產(chǎn),力求將ELISA技術(shù)的加樣、溫育、洗板及判讀結(jié)果過程的科學(xué),有機、系統(tǒng)地結(jié)合,盡可能地減少各環(huán)節(jié)的人為因素的影響,實現(xiàn)ELISA技術(shù)的自動化操作。

人抗中性粒/中心體抗體(ACA)elisa試劑盒 操作基本步驟:

1 試劑準(zhǔn)備:所有試劑在使用前應(yīng)平衡至室溫,使用后請立即按照說明書要求保存試劑。實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。

2 加樣:加樣或加試劑時,*個孔與zui后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導(dǎo)致不同的 “預(yù)溫育”時間,從而明顯地影響到測量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)控制在10分鐘內(nèi)。*設(shè)置復(fù)孔進行實驗。

3 溫育:為防止樣品蒸發(fā),實驗時將加上蓋或覆膜的酶標(biāo)板置于濕盒內(nèi),以避免液體蒸發(fā);洗板后應(yīng)盡快進行下步操作,任何時侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài);同時應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的溫育時間和溫度。

4 洗滌:洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上拍干,勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水,同時要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響zui后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。

5 試劑配制:Detection ADetection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配制使用,并使用相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。請精確 配制標(biāo)準(zhǔn)品及工作液,盡量不要微量配制(如吸取檢測溶液A時,一次不要小于10 ),以避免由于不準(zhǔn)確稀 釋而造成濃度誤差;請勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液。

6 反應(yīng)時間的控制:加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),避免反應(yīng)過強從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。

7 底物:底物請避光保存,在儲存和溫育時避免強光直接照射。

人抗中性粒/中心體抗體(ACA)elisa試劑盒充說明

1. 在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,試劑避免受到微生物的污染,因為蛋白水解酶的干擾將導(dǎo)致出現(xiàn)錯誤的結(jié)果。

2. 小心吸取試劑并嚴(yán)格遵守給定的孵育時間和溫度。請注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品,酶結(jié)合物或底物時,*個孔與zui后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導(dǎo)致不同的 “預(yù)孵育”時間,從而明顯地影響到測量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。而且,洗滌不充分將影響試驗結(jié)果。

3. 試劑盒保存:部分試劑保存于-20℃,部分試劑保存于2-8℃,具體以標(biāo)簽上的標(biāo)示為準(zhǔn)。

4. 濃洗滌液會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。

5. 剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會含有少許水樣物質(zhì),此為正常現(xiàn)象,不會對實驗結(jié)果造成任何影響。

6. 中、英文說明書可能會有不*之處,請以英文說明書為準(zhǔn)。

7. 所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。

8. 有效期:6個月

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人抗中性粒/中心體抗體(ACA)elisa試劑盒操作步驟:

實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫,試劑不能直接在37 溶解;試劑或樣品配制時,均需充分混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液 100 ,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100 ,注意不要有氣泡,加樣 時將樣品加于酶標(biāo)板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37 溫育2小時。為保證實驗結(jié)果有效

性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100 (臨用前配制),酶標(biāo)板加上覆膜,37 溫育1小時。

3 棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400 /每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

4 每孔加檢測溶液B工作液(臨用前配制)100 ,加上覆膜,37 溫育1小時。

5 棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3

6 每孔加底物溶液90 ,酶標(biāo)板加上覆膜37 避光顯色(反應(yīng)時間控制在15-30分鐘,當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯時,即可終止)。

7 每孔加終止溶液50 ,終止反應(yīng),此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物 液的加入順序相同。

8 立即用酶標(biāo)儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。

 

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