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人苯*(LPA)ELISA Kit說明書

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產(chǎn)品型號(hào)含量測定

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更新時(shí)間:2015-04-21 16:40:28瀏覽次數(shù):243次

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北京方程生物公司中“方程"取自function 的音譯,寓意是把整個(gè)國家的生物產(chǎn)業(yè)比喻成了一部運(yùn)轉(zhuǎn)的機(jī)器,方程生物公司作為其產(chǎn)業(yè)中的一分子的使命————為這個(gè)大機(jī)器提供原料、零件和服務(wù),為科研領(lǐng)域的發(fā)展作出更多貢獻(xiàn)。

人苯*(LPA)ELISA Kit說明書

用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法: 
1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。 
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔)。 
3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時(shí),洗滌。 
4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。 
5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。 
6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+"、“-"號(hào)表示。也可測O·D值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測各孔O·D值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽性。

人苯*(LPA)ELISA Kit說明書


Elisa實(shí)驗(yàn)常用方法: 
雙抗體夾心法測定抗原 

將抗原免疫*種動(dòng)物獲得的抗體吸附于固相表面;

加抗原,形成抗原-抗體復(fù)合物; 

加抗原免疫第二種動(dòng)物獲得的抗體,形成抗體抗原抗體復(fù)合物;

加酶標(biāo)抗抗體(第二種動(dòng)物抗體的抗體); 

加底物。底物的降解量=抗原量。

人苯*(LPA)ELISA Kit說明書

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