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人D-乳酸脫氫酶(D-LDH) ELISA試劑盒

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更新時間:2018-04-07 22:46:19瀏覽次數(shù):177次

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按以上方法制備的酶結(jié)合物一般都混有未結(jié)合物的酶和抗體。理論上,結(jié)合物中混有的游離酶一般不影響ELISA中zui后的酶活性測定,因經(jīng)過*洗滌,游離酶可被除去,并不影響zui終的顯色。但游離的抗體則不同,它會與酶標(biāo)抗體競爭相應(yīng)的固相抗原,從而減少了結(jié)合到固相上的酶標(biāo)抗體的量。因此制備的酶結(jié)合物應(yīng)予純化,去除游離的酶和抗體后用于檢測,效果更好。純化的方法很多,分離大分子化合物的方法均可應(yīng)用。硫酸銨鹽析法zui為簡便,但效果并不理想,因為此法只能去除留在上清中的游離酶,但相當(dāng)數(shù)量的游離抗體仍與酶結(jié)合物一起沉淀而不能分開。用離子交換層析或分子篩分離更為可取,高效液相層析法可將制備的結(jié)合物清晰地分成三個部分:游離酶、游離抗體和純結(jié)合物而取得*的分離效果,但費用較貴。

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