人組織相容性2-K1-K 區(H2-K1)ELISA試劑
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3.2.3 結合物的制備
酶標記抗體的制備方法主要有兩種，即戊二醛交聯法和過碘酸鹽氧化法。
（1）戊二醛交聯法：戊二醛是一種雙功能團試劑，它可以使酶與蛋白質的氨基通過它而聯結。堿性磷酸一般用此法進行標記。交聯方法一步法、兩步法兩種。在一步法中戊二醛直接加入酶與抗體的混合物中，反應后即得酶標記抗體。
ELISA中常用的酶一般都用此法交聯。它具有操作簡便、有效（結合率達60%-70%）和重復性好等優點。缺點是交聯反應是隨機的，酶與抗體交聯時分子間的比例不嚴格，結合物的大小也不均一，酶與酶，抗體與抗體之間也有可能交聯，影響效果。在兩步法中，先將酶與戊二醛作用，透析除去多余的戊二醛后，再與抗體作用而形成酶標抗體。也可先將抗體與戊二醛作用，再與酶聯結。兩步法的產物中絕大部分的酶與蛋白質是以1:1的比例結合的，較一步法的酶結合物更有助于本底的改善以提高敏感度，但其偶聯的有效率較一步法低。
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