人蛋白*磷酸酶(PTP)ELISA試劑盒

酶標(biāo)（ELISA，EIA）診斷試劑盒操作中出現(xiàn)的問(wèn)題：現(xiàn)象、可能原因和解決辦法

1、 不同廠(chǎng)家生產(chǎn)的試劑盒因生產(chǎn)工藝和操作方法略有不同，務(wù)必按照所用試劑盒嚴(yán)格操作，否則容易產(chǎn)生檢測(cè)結(jié)果的不確定性.

2、 若不同批號(hào)試劑的不同組分（A液或酶工作液），或不同試劑的不同組分進(jìn)行交叉使用，有可能出現(xiàn)顯色淺或本底高，花板等情形。

3、 加樣時(shí)樣品量誤差，對(duì)于陰或很陽(yáng)的標(biāo)本影響不大，但對(duì)閾值附近的標(biāo)本影響*，建議校對(duì)加樣器。

4、 反應(yīng)時(shí)間的誤差，做大量標(biāo)本時(shí)，*孔和zui后一孔以及一些特殊標(biāo)本可能影響較大。

5、 由于滴瓶的精密性肯定不如加樣器，不排除不同滴頭滴量的誤差。另外滴加過(guò)程中是否產(chǎn)生氣泡、速度是否均勻，是否顫動(dòng)等影響液量的因素均可導(dǎo)致以上情況。高標(biāo)準(zhǔn)要求時(shí)應(yīng)使用加樣器。

6、 閾值附近實(shí)際上是個(gè)灰區(qū)（gray scale）,不能截然分為陰性、陽(yáng)性，國(guó)外廠(chǎng)家均要求對(duì)這部分可疑標(biāo)本進(jìn)行奇數(shù)次復(fù)檢，以次數(shù)多者為準(zhǔn)，如一次陽(yáng)兩次陰zui后判為陰，但實(shí)際上是否為陰不好說(shuō)，只有判為可疑，臨床上可以讓患者過(guò)一段時(shí)間后再測(cè)。

7、 肉眼觀察稍顯色，酶標(biāo)儀打印為陰性的標(biāo)本在實(shí)際工作中是難以避免的，肉眼目測(cè)結(jié)果不可靠，應(yīng)以酶標(biāo)儀判讀為準(zhǔn)。

8、 由陰性變?yōu)閺?qiáng)陽(yáng)性原因多為操作過(guò)程中漏加試劑等有關(guān)。

9、 臨界值附近標(biāo)本波動(dòng)為正常現(xiàn)象，任何試劑均不可避免。可以考慮將標(biāo)本做奇數(shù)次復(fù)檢。

人蛋白*磷酸酶(PTP)ELISA試劑盒

結(jié)合物

結(jié)合物即酶標(biāo)記的抗體（或抗原），是ELISA中zui關(guān)鍵的試劑。良好的結(jié)合物應(yīng)該是既保有酶的催化活性，也保持了抗體（或抗原）的免疫活性。結(jié)合物中酶與抗體（或抗原）之間有恰當(dāng)?shù)姆肿颖壤诮Y(jié)合試劑中應(yīng)盡量不含有或少含有游離的（未結(jié)合的）酶或游離的抗體（或抗原）。此外，結(jié)合物尚要有良好的穩(wěn)定性。

人蛋白*磷酸酶(PTP)ELISA試劑盒