豬干擾素-γ（IFN-γ）ELISA試劑盒

試劑盒組成及試劑配制

1. 酶聯板：一塊（96孔）

2. 標準品（凍干品）：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為1,000 pg/ml，做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋）后，分別稀釋1,000 pg/ml，500 pg/ml，250 pg/ml，125 pg/ml，62.5 pg/ml，31.2 pg/ml，15.6 pg/ml，樣品稀釋液直接作為標準濃度0 pg/ml，臨用前15分鐘內配制。如配制500 pg/ml標準品：取0.3ml（不要少于0.3ml）1,000 pg/ml的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

3. 樣品稀釋液：1×20ml。

4. 檢測稀釋液A：1×10ml。

5. 檢測稀釋液B：1×10ml。

6. 檢測溶液A：1×120μl（1:100）臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋，稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制（100μl/孔），實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl檢測溶液A加990μl檢測稀釋液A的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制。

7. 檢測溶液B：1×120μl/瓶（1:100）臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。

8. 底物溶液：1×10ml/瓶。

9. 濃洗滌液：1×30ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。

10. 終止液：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

11. 覆膜：5張

12. 使用說明書：1份

豬干擾素-γ（IFN-γ）ELISA試劑盒

高值鉤鐮效應（HD-HOOK）
◎在二位點夾心ELISA中，其劑量反應曲線的高劑量（HIGH DOSE，HD）區段，線性走向不是呈平臺狀無限后延，而是向下彎曲狀，似一只鉤子或一把鐮刀（HOOK），MILES（1974） 根據此現象寫實性地稱之為"HD-HOOK"效應。產生該現象的分子機理有"分子變構說"和"濃度效應"等推論。
◎一步法和二步法均存在， 只是前者出現的更早些，大多數是高值低吸光度，很少陰性結果。

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