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檢測原理:
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗豬TF/CD142抗體包被于酶標板上,實驗時標本或標準品中的TF/CD142會與包被抗體結合,游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗豬TF/CD142抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素。抗豬TF/CD142抗體與結合在包被抗體上的豬TF/CD142結合、生物素與親和素特異性結合而形成免疫復合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物,TMB在辣根過氧化物酶的催化下現藍色,加入標本。
血清:全血標本于室溫放置2小時或4℃后于1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,收集血液的試管應為一次性的無熱原,無內毒素試管。
血漿:抗凝劑推選使用EDTA,標本采集后30分鐘內于1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測。避免使用溶血,高血脂標本。
其它生物標本:1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測標本應清澈透明,懸浮物應離心去除。標本收集后若不及時檢測,請按一次使用量分裝,凍存于-20℃/-80℃電冰箱內,避免反復凍融,6個月內進行檢測,4℃保存的應在1周內進行檢測。 如果樣本中檢測物濃度高于標準品zui高值,請根據實際情況,做適當倍數稀釋(建議先做預實驗,以確定稀釋倍數)。
酶標儀(450nm波長濾光片)高精度移液器,EP管及一次性吸頭:0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL,200-1000μL37℃恒溫箱, 雙蒸水或去離子水。
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ELISA產品特點稀釋方法:
方法1. 實驗前,將凍干粉抗體用無菌蒸餾水稀釋(或PBS稀釋),將稀釋后的抗體分裝5-10支(20ulx5支或10ulx10支),放入-20℃保存,用一支拿一支,避免反復凍溶。
方法2. 實驗前,也可將凍干粉抗體用無菌蒸餾水稀釋50ul(或PBS稀釋50ul)成原液:再加50%甘油, 放入-20℃保存,用多少吸多少。
方法3. 預試驗可做幾個梯度1:100、200、400背景高還可做上去,選一個*的稀釋比例,再正式做,效果。工作液的稀釋-使用抗體稀釋液。
石蠟切片和冰凍切片的比較。
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