這些ELISA試劑盒抗體就會與HEV 的多肽抗原結合，并固定在上面，洗板除掉其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后參加羊抗人IgM-HRP（辣根過氧化物酶）酶結合物，經第二次孵育后，ELISA檢測試劑盒酶結合物就會與*次孵育結合上的HEV IgM抗體相結合，洗板除掉未結合的酶結合物，參加TMB底物溶液，在第三次孵育時會發作酶-底物反響，只要那些含有HEV IgM抗體和酶結合物所構成的復合物的孔才會發作色彩改動，參加硫酸溶液停止酶和底物間的反響，并在波長: 450nm處丈量O.D.值,(一) 基本原理ELISA檢測試劑盒辦法的基本原理是酶分子與抗體或抗抗體分子共價結合，此種結合不會改動抗體的免疫學特性，也不影響酶。
ELISA試劑盒此種酶符號抗體可與吸附在固相載體上的抗原或抗體發作特異性結合。滴加底物溶液后，底物可在酶效果下使其所含的供氫體由無色的還原型變成有色的氧化型，ELISA檢測試劑盒呈現色彩反響。因而，可通過底物的色彩反響來斷定有無相應的免疫反響，色彩反響的深淺與標本中相應抗體或抗原的量呈正比。
此種顯色反響可通過ELISA檢測試劑盒儀進行定量測定，這樣就將酶化學反響的靈敏性和抗原抗體反響的特異性結合起來，使ELISA辦法成為一種既特異又靈敏的檢測辦法。