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寒風(fēng)冷冷,豐壽補(bǔ)充ELISA試劑盒檢測(cè)要點(diǎn)

時(shí)間:2020-1-10閱讀:844
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要點(diǎn)一:
試劑,良好的儀器和準(zhǔn)確的操作是確保ELISA試劑盒檢測(cè)成果正確可靠的必要條件。血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份均同便是血清。

如有細(xì)菌污染,菌體中或許含有內(nèi)源性HRP ,也會(huì)發(fā)生假陽(yáng)性反應(yīng)。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定,有些則需經(jīng)預(yù)處理。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,而血清標(biāo)本只要待血清天然凝結(jié)、血kuai收縮后即可取得。大部分ELISA試劑盒檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。

在ELISA中血漿和血清可相等應(yīng)用。凍結(jié)血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,散布不均,應(yīng)充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下倒置混和,不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩。混濁或有沉積的血清標(biāo)本應(yīng)先離心或過(guò)濾,澄清后再檢測(cè)。

要點(diǎn)二:
可用作ELISA測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛,體液、分泌物和排泄物等均可作標(biāo)本以測(cè)定其間某種抗體或抗原成份。反復(fù)凍融會(huì)使抗體效價(jià)下跌,所以測(cè)抗體的血清標(biāo)本如需保存作屢次檢測(cè),宜少量分裝冰存。

一般說(shuō)來(lái),在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃,超過(guò)一周測(cè)定的需低溫冰存。如在冰箱中保存過(guò)久,其間的可發(fā)生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深。

保存血清自采集時(shí)就應(yīng)留心無(wú)菌操作,也可參加恰當(dāng)防腐劑。除特別情況外,在醫(yī)學(xué)檢修中均以血清作為檢測(cè)標(biāo)本。本文將敘說(shuō)板式ELISA各個(gè)操作步驟的留心要點(diǎn),珠式、管式及磁性球ELISA試劑盒均與特別儀器配合應(yīng)用,兩者均有具體的使用說(shuō)明,嚴(yán)厲遵照劃定操作,必能得出正確的成果。

要點(diǎn)三:
血清標(biāo)本可按慣例方法采集,應(yīng)留心避免溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)開(kāi)釋出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為標(biāo)記的ELISA試劑盒測(cè)定中,溶血標(biāo)本或許會(huì)增加非特異性顯色。

ELISA的操作因固相載體的構(gòu)成不同而有所差異,海內(nèi)醫(yī)學(xué)檢修一般均用板式點(diǎn)。

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