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使用時溫浴的方法:
1)加標本后和加結合物后,應立即放入按規定的反應溫度的水浴箱。
2)各ELISA板不應疊在一起。
3)為避免蒸發,板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕紗布的金屬濕盒中。
4)加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。
5)如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
造成elisa試劑盒實驗結果不滿意的原因:
(1)試劑盒、樣品用前未平衡至室溫。
(2)必須在有效期內使用,超過有效期的產品可能會產生很弱的信號。
(3)加入試劑的體積和時間有誤,移液器計量不準,吸嘴內水分太多或不清潔。
(4)試劑盒沒有按規定進行保存,受高溫影響。
(5)洗板及加樣過程中,酶標受污染失活而失去催化顯色劑顯色的能力。
(6)洗板次數過多,或濃縮洗液稀釋倍數不符合要求,洗滌沖擊力太大,浸泡時間太長。
(7)孵育時間及孵育溫度未達到要求,反應板放入培養箱時注意溫度并及時調整。
(8)底物作用時間不夠。
(9)蒸餾水水質有問題。
(10)顯色劑加量不足或順序顛倒,或混合后加入。
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