ELISA試劑盒試驗室質量管理的要素是挑選和履行適當的室內質量操控(internal quality control,IQC)程序，例如根據測定項意圖質量要求和辦法特色挑選核算學規范、操控規矩和質控品的數目，并嚴格履行IQC程序以進步IQC的質量。室內質控辦法許多，但酶聯免疫吸附測定(ELISA)中仍首要選用Levey-Jennings質控圖。筆者長時間從事免疫學查驗質量管理工作。發現醫院、血站查驗科在實踐工作中存在一些比較遍及的問題或疑問。根據本身實踐經驗，結合相關專著，扼要介紹如下，供試驗室參閱。
1.質控品準預備
1.1 質控品濃度 以需求質控的點設值進行質控，般在Cut-of值(即CO值，是由試劑盒供給的公式核算出的陰、陽性判別規范)鄰近選點。主張選點辦法。挑選S/CO值減去精密度測定中得到的3倍批間CV與S/CO值的乘積(意即3倍s)仍大于1的質控血清作為判別試驗室重復性的室內質控點。
1.2 購買質控品主張用戶購買質控品進行室內質量操控，這樣的質控品的穩定性更有確保。首要項目在衛生部臨床查驗中心都有長時間供給(北京東單大華路1號北京醫院內衛生部臨床查驗中心免疫質量操控室，：1O0730)
1.3 自制質控品的制備辦法 (1)搜集陽性血清(無顯著溶血、黃疽、脂血或污染血清)，累積到一定數量(夠本室運用6月以上)；(2)混勻，經56℃ lO小時滅活，(3)離心或過濾，去除纖維沉淀物(4)用正常人血清或10%小牛血清PBS溶液稀釋．使S/CO值到達2～4之間(5)與定值參閱品進行比照，求測定值(6)將質控血清按0.2～O.5毫升/支分裝、封口、貼簽，置-2O℃保存。
2.ELISA試劑盒怎么正確運用“立刻法”進行質控不能隨意運用“立刻法”，以下情況下可運用：(1)試驗室不是每天進行ELISA項意圖查驗，而ELISA試劑盒效期短．用一批號試劑盒接連慣例檢測2O次以取得RCV數據難度較大。選用“立刻法”質控核算辦法，只需接連測3次，即可對第3次查驗成果進行質控；(2)在某一檢測項目開端預備展開Levey-Jennings室內質控，沒有完結RCV測定時運用，其意圖是盡早啟動室內質控，在展開lI缶床試驗的一起進行RCV測定，以便在獲取滿足數據后轉入Levey-Jennings室內質控。因為數據量小，質控規矩單一，“立刻法”質控辦法可靠性相對較差。在運用該質控辦法時，有必要加強試驗全程監控以確保質量，并在獲取滿足數據后及時轉入Levey-Jennings室內質控。試驗室需求替換質控品批號時，應提早開端下一批號質控品RCV靶值和規范差的測定，盡量防止運用“立刻法”質控辦法。
3.質控規矩的挑選
一般以x靶±2s為正告限，以x靶士3s為失控限(這是*的判別試驗成果是否失控的準則)，取得“慣例試驗室質量操控圖”空圖。每次(或每天)隨患者樣本測定的質控物值，標記在質控圖上。分析質控圖中每天檢測質控標本的成果散布，判別當天檢測的成果數值是否在操控限之內。各試驗室挑選失控*，應根據本室條件進行選定。失控限制得太寬，幾乎不用憂慮有失控可能，這樣常將失控成果誤判為合格，使質控失掉含義；相反，失控限制得太嚴，使太多的成果乃至合格的成果判為失控，這也使質控失掉含義。根據本室條件，設定失控限，是室內質控重要的環節。Westgard多規矩質控分析法：在質控圖中，單純根據質控點超出2s為正告，超出3s為失控，在臨床查驗中已顯不行。Westgard將常用的判別失控的規矩總結出許多條規矩，挑選質控規矩時有必要統籌室內質控對失控的檢出才能及誤判失控的可能性。在免疫學查驗質控中，主張試驗室挑選運用以下
幾種質控規矩：(1)13s:1個質控點落在士3s之外；(2)R4s：接連2個質控點相差超出4s規模；(3)41s:接連4個質控點落在同一側士1s之外；(4)7x靶：接連7個質控點落在均值之一側；(5)7t：接連7個質控點呈接連上升或下降，或周期性動搖改變。質控規矩還有許多，各試驗室可根據自己的實踐情況挑選質控規矩。
4．替換試劑批號的處理方式
因為ELIsA試劑的效期相對較短，而在冷凍條件下，免疫質控血清效期相對較長，一個批號的質控血清往往要幾個批號的試劑才會用完，因而試驗中常會遇到替換試劑批號后怎么處理質控圖的問題。替換不同廠家的試劑有必要從頭核算RCV(在替換前完結RCV的測定，以免中止室內質控)。替換相同廠家不同批號的試劑，運用質控血清濃度值上下相鄰的系列質控血清驗證新批號試劑S/CO值的一致性。引薦對不同批號試劑間系列血清成果回歸方程進行比較，以取得兩批試劑間的換算因子，能夠在同一質控圖上持續描點。當換算因子為1時，運用實測S/CO值作圖。從理論上說，兩個回歸方程經核算學查驗差異無核算學含義時，能夠連續運用上批號質控圖。
5.分批質控辦法
進行大批量標本的檢測時存在批內變異與批間變異的問題。有的試驗室每天需測驗數百人的血清樣品，運用數塊乃至數十塊微孔板這就存在同一天檢測數塊板之間的變異(批內變異)和不同天檢測之間的變異(批間變異)的問題。引薦進行免疫試驗室室內質控的批內、批間室內質量操控具體辦法如下(以1 ncu/ml抗-HIV舉例)。
5.1 每天進行多個酶標板檢測，每板均進行室內質控標本測定，核算室內質控標本的S/CO值，見表1。核算上表各板質控數據均數的均值和規范差時需遵從RCV的核算準則。2o d均值的均數和規范差，即為批間變異的靶值和規范差()，以操控天間變異，也稱批間變異,以2O天的規范差的均值作為批內規范差，以20天均值的均值作為批內靶值()，以操控天內不同檢測批之間的變異，也稱批內變異。
5.2 ELISA試劑盒批內和批問Levey-Jennings質控圖的繪圖辦法批內Levey-Jennings質控圖用每個酶標板質控S/CO值描點，以調查和操控各板之問的變異。批內Levey-Jennings質控圖描點描在一張質控圖上(留意區分，作好相應記錄)，便于調查質控成果的會集趨勢和離散程度，也能夠按完結檢測批的先后順序描在數張質控圖上，每天按相應批對應作圖。批間Levey-Jennings質控圖用宣布陳述時現已完結的各個酶標板質控S/CO值的均值描點，以操控日間變異。批間Levey-Jennings質控圖繪圖辦法可能有不斷定的時分，如完結批或第二批時，可能不知道是否還有第三批乃至第四批(關于醫院體系尤其可能發生，因為當天標本數量不能斷定，而先完結的陳述不可能等一切標本完結檢測后才宣布)，筆者主張能夠以當時已有質控S/CO值的均值描點，作為當時批間Levey-Jennings質控圖，以判別已完結檢測成果的質控狀況；當有新的質控數據發生后，與前述質控數據(如有失控，則應剔除失控的質控S/CO值),核算S/CO值均值并描點，作為新的閱覽Levey-Jennings質控圖，以判別新完結檢測成果的質控狀況。批間Levey-Jennings質控圖描點與批問Levey-Jennings質控圖描點一樣，既能夠會集在一張質控圖上作圖，也能夠按完結檢測批的先后順序分隔作圖。