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谷胱系列還原型(GSH)測試盒_微量法

參  考  價:面議
具體成交價以合同協議為準

產品型號100管/96樣

品牌

廠商性質經銷商

所在地上海市

更新時間:2022-07-26 10:12:54瀏覽次數:525次

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品牌 紀寧生物 貨期 現貨供應
有效期 6個月 用途 僅供科研實驗使用
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谷胱系列還原型(GSH)測試盒_微量法

測定方法:微量法

產品規格:100管/96樣

注    意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義:

GSH是細胞內主要的抗氧化巰基物質,在抗氧化、蛋白質巰基保護和氨基酸跨膜運輸等中具有重要作用。還原型與氧化型比值(GSH/GSSG)是細胞氧化還原狀態的主要動態指標。因此,測定細胞內GSH和GSSG含量以及GSH/GSSG比值,能夠很好地反映細胞所處的氧化還原狀態。

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測定原理:

DTNB與GSH反應生成復合物,在412nm處有特征吸收峰;其吸光度與GSH含量成正比。

自備儀器和用品:

低溫離心機、水浴鍋、可調節移液器、可見分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、和蒸餾水。

試劑組成和配制:

試劑一:液體×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體×1瓶,4℃保存。

試劑三:液體×1瓶,4℃避光保存。

谷胱系列還原型(GSH)測試盒_微量法

粗酶液提取:

1. 組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿。8000g,4℃離心10min,取上清置冰上待測。

2. 細菌、真菌:按照細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后8000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測。

3. 血清等液體:直接測定。

GSH測定操作:

1. 分光光度計/酶標儀預熱30min,調節波長到412 nm,蒸餾水調零。

2. 試劑二置于25℃(一般物種)或者37℃(哺乳動物)水浴中保溫30min。

3. 空白管:取微量玻璃比色皿或96孔板,依次加入20μL蒸餾水,140μL試劑二,40μL試劑三,混勻靜置2min后測定412 nm吸光度A1。

4. 測定管:取微量玻璃比色皿或96孔板,依次加入20μL上清液,140μL試劑二,40μL試劑三,混勻靜置2min后測定412 nm吸光度A2。

注意:空白管只需要測定一次。


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