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ELISA試劑盒板的制造流程

閱讀：373發(fā)布時間：2015-1-18

關于ELISA試劑盒實驗相信各位老師都不陌生，ELISA試劑盒實驗一般包含兩個或以上的孵育步驟，中間以洗滌隔開。ELISA試劑盒通常在96孔板中開展，其上包被了結合抗原或抗體。

在封閉步驟后，包被后的平板首先與一抗或抗原孵育。隨后通過一些洗滌步驟去除未結合（低親和力）的抗原-抗體復合物。接著，平板與二抗孵育。這種帶有酶的抗體與高親和力的抗原-抗體復合物結合。之后，又是一輪洗滌。

zui后是添加底物并檢測信號。是比包被體積更高。太少的洗滌液會讓一部分分析表面洗滌不到，從而明顯增加背景。所有反應孔的洗滌量必須相同。ELISA試劑盒板的制造商通常會在試劑盒的使用手冊中列出包被量。行業(yè)中通常使用的包被量是200 μl。如果你的試劑盒也是這樣，那么制造商可能會建議使用300 μl洗滌液進行洗滌，以便清潔整個反應孔的壁。

一般來說，洗滌量越高，則孵育步驟殘留的抗體或抗原量就越少。通常的做法是在每次抗體或抗原孵育后重復洗滌三次。不過，一般而言，制造商包被平板需要的洗滌次數比用戶包被的平板要少。對于用戶包被ELISA試劑盒板，必須優(yōu)化洗滌次數。

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