ELISA檢測試劑盒在實驗條件(包括試劑)較難保證恒定的情況下，這種判斷法較為合適。在得出標本( S)和陰性對照(N)的A 值后，計算S/N 值。也有寫作P/N 的，這里的P 不代表陽性(positive)，而是病人(pati ent)的縮寫，不應誤解。為避免混淆，更宜用S/N 表示。在早期的間接法ELISA檢測試劑盒中，有些作者定出S/N 為陽性標準，現多為各種測定所沿用。實際上每一測定系統應該用實驗求出各自的 S/N 的閾值。更應注意的是，N 所代表的陰性對照是不含受檢物質的人血清。有的試劑盒中所設陰性對照為不含蛋白質或蛋白質含量較底的緩沖液，以致反應后產生的本底可能較正常人血清的本底低得多。定性測定的結果判斷是對受檢標本中是否含有待測抗原或抗體作出 "有"或"無"的簡單回答，分別用"陽性"、"陰性"表示。"陽性"表示該標本在該測定系統中有反應。"陰性"則為無反應。用定性判斷法也可得到半定量結果，即用滴度來表示反應的強度，其實質仍是一個定性試驗。
ELISA檢測試劑盒在這種半定量測定中，將標本作一系列稀釋后進行試驗，呈陽性反應的zui高稀釋度即為滴度。根據滴度的高低，可以判斷標本反應性的強弱，這比觀察不稀釋標本呈色的深淺判斷為強陽性、弱陽性更具定量意義。在間接法和夾心法 ELISA檢測試劑盒中，陽性孔呈色深于陰性孔。在競爭法ELISA 中則相反，陰性孔呈色深于陽性孔。
兩類反應的結果判斷方法不同，分述于下。在ELISA檢測試劑盒中一般有3次加樣步聚，即加標本，加酶結合物，加底物。加樣時應將所加物加在ELISA檢測試劑盒板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出，不可產生氣泡。加標本一般用微量加樣器，按規定的量加入板孔中。每次加標本應更換吸嘴，以免發生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。
ELISA檢測試劑盒有此測定（如間接法ELISA試劑盒）需用稀釋的血清，可在試管中按規定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液，再在其中加入血清標本，然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。加酶結合物應用液和底物應用液時可用定量多道加液器，在ELISA檢測試劑盒中一般有兩次抗原抗體反應，即加標本和加酶結合物后。
