ELISA的技能點(diǎn)我們了解多少
為了得到非常好的試驗(yàn)成果，一些ELISA試劑盒試驗(yàn)新手們還需多加了解技能內(nèi)容，公司每周都會(huì)為您精心整理出重點(diǎn)技能方法，可以嫻熟的掌握好這些以后再應(yīng)用到試驗(yàn)里面就會(huì)簡略的多。今天的主要內(nèi)容ELISA試劑盒的一些技能關(guān)鍵：
樣本加樣方法
1、細(xì)胞上清：前處理有必要是細(xì)胞離心去掉，每孔直接加100μl即可。假如濃度太高需稀釋時(shí)，用規(guī)范品稀釋液直接稀釋。
2、腦脊液：前處理有必要是細(xì)胞離心去掉，每孔直接加100μl即可。假如濃度太高需稀釋時(shí)，用規(guī)范品稀釋液直接稀釋。
3、血清血漿：請(qǐng)參加50ul樣本剖析緩沖液后加50ul標(biāo)本,如稀釋量大，請(qǐng)將樣本與樣本剖析緩沖液等量參加，缺乏部分用規(guī)范品稀釋液彌補(bǔ)至100ul。
4、安排勻漿液的樣本，要制備過程中需要在緩沖液中參加蛋白酶按捺劑，防止蛋白成份被內(nèi)源性蛋白酶降解，形成檢查成果的值偏低。
A.血清標(biāo)本應(yīng)是自然凝結(jié)后，取上清，防止在冰箱中凝結(jié)血液；
B.血漿標(biāo)本，引薦用EDTA的方法搜集若待測樣本不能及時(shí)檢查，標(biāo)本搜集后請(qǐng)分裝，凍存于－20℃，防止反復(fù)凍融。
c.血清標(biāo)本不該增加任何防腐劑或抗凝劑；
D.標(biāo)本應(yīng)明澈通明，檢查前樣本中如有懸浮物應(yīng)經(jīng)過離心去掉。
E.請(qǐng)勿運(yùn)用溶血，高血脂或污染的標(biāo)本檢查，不然成果將不。
因安排勻漿液的樣本蛋白品種多，含量豐厚，試驗(yàn)參照血清血漿標(biāo)本的處理方法進(jìn)行，不然就會(huì)影響試驗(yàn)成果。詳細(xì)是參加50ul樣本剖析緩沖液后加50ul標(biāo)本，需稀釋時(shí)，請(qǐng)將樣本與樣本剖析緩沖液等量參加，缺乏部分用規(guī)范品稀釋液彌補(bǔ)至100ul。
因?yàn)榉结樀鞍撞灰粯樱苍S形成降解的蛋白類型也許不一樣，假如試驗(yàn)前經(jīng)過文獻(xiàn)斷定用哪種蛋白酶按捺劑，有針對(duì)性參加，可節(jié)約按捺劑。假如查不到有關(guān)文獻(xiàn)，可采用組合按捺的方法保證蛋白不易被降解。
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