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ELISA實驗中樣本的收集方法

閱讀:242發布時間:2017-4-27

                                                                           

ELISA試劑盒在收集標本前都必須有一個完好的計劃,必須理解要查看的成份是不是滿足安穩。新鮮標本應盡早查看,對收集后當天就進行查看的標本,應及時儲存在4℃備用。如因格外因素需要守時、多次收集標本,請選材后,將標本及時分裝后放在-20℃或以下條件下保存。由于蛋白樣品多不安穩,很簡單降解,應防止重復凍融,以削減對實驗的影響。今日我們和我們同享ELISA實驗中樣本的收集方法:

一、液體類標本,液體類標本包含血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
血清:室溫血液天然凝聚10-20分鐘后,離心20分鐘支配(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有堆積構成,應再次離心。
血漿:應根據標本的請求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘支配(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有堆積構成,應再次離心。
尿液:用無菌管收集。離心20分鐘支配(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有堆積構成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此施行。
細胞培養上清:查看排泄性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘支配(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。查看細胞內的成份時,用PBS(pH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度到達100萬/ml支配。通過重復凍融,以使細胞損壞并放出細胞內成份。離心20分鐘支配(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有堆積構成,應再次離心。

二、組織標本:收集標本后,稱取組織毛重,用液氮靈敏冷凍保存備用。標本融化后要保存在2-8℃的溫度,參與一定量的PBS(pH7.2-7.4),用手工或電動勻漿器將標本充沛勻漿。4℃離心(10000-15000轉/分)10-20分鐘。收集上清,留取恰當查看,其他冷凍保存備用。
備注:假設樣本中的待檢物需要提純,請客戶自行處理。
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