ELISA試劑盒實驗需根據(jù)自身需求選擇96孔板或是384孔板進行ELISA實驗。
現(xiàn)在查看ELISA有很多途徑，我們可以根據(jù)自個的偏好進行選擇。一般ELISA查看的是酶促反應(yīng)的可溶性產(chǎn)品，抗體上聯(lián)絡(luò)有相應(yīng)的酶（例如一般運用的辣根過氧化物酶HRP），而反應(yīng)體系中添加有相應(yīng)的底物（如3，3-二氨基聯(lián)苯胺DAB）。
ELISA試劑盒盡管有多種類型，不過它們都有一個一起特征，就是進行抗原捕獲。
一般捕獲方法包括將抗原吸附到微孔板或許用微孔板上的抗體進行捕獲。
In-cell ELISA和酶聯(lián)免疫斑斕ELISPOT是兩種格外的類型，In-cell ELISA需求將微孔板中培養(yǎng)的細胞進行固定和通透化，然后再用抗體原位查看。ELISPOT有點像蛋白印跡Western blot，先在帶膜的微孔板中培養(yǎng)細胞，然后在膜上查看細胞分泌的抗原構(gòu)成斑斕。
這種酶促反應(yīng)生成具有特征性的顏色，可以經(jīng)過分光光度計進行查看，堿性磷酸酶AP也是一種常用酶。
ELISA試劑盒在用雙抗夾心法進行ELISA查看時，查看用的二抗有必要特異性關(guān)于查看一抗，而不能與捕獲抗體起反應(yīng)。
假設(shè)查看用二抗與捕獲抗體聯(lián)絡(luò)，實驗特異性就會大打折扣。
一般我們選用源自不一樣宿主的捕獲抗體和查看一抗，來避免上述疑問。
酶可以聯(lián)絡(luò)在一抗上，也可以聯(lián)絡(luò)在二抗上，還可以運用鏈霉親和素符號的酶與親和素符號的一抗聯(lián)絡(luò)。此外ELISA的效果查看還包括放射性查看、熒光查看、化學(xué)發(fā)光或顯色法查看等。
單克隆抗體和多克隆抗體都可以用于ELISA試劑盒，ELISA試劑盒實際上有時候二者聯(lián)絡(luò)效果非常好。例如，關(guān)于雙抗夾心法而言，用多抗進行捕獲而單抗進行查看有時更有協(xié)助。
多抗可以保證捕獲全部抗原，隨后單抗再特異性查看具有特定抗原表位的抗原。
假設(shè)抗體間發(fā)生抵觸或交叉反應(yīng)就會影響全部實驗的特異性。
ELISA試劑盒其間抗體來歷所帶來的兼容性就是交叉反應(yīng)的一個要素。盡管現(xiàn)在收購源自動物的抗體越來越簡略，我們?nèi)杂斜匾姓J一下是不是會發(fā)生交叉反應(yīng)的疑問。
