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Elisa試劑盒洗液使用原則與洗滌方式

閱讀:395發布時間:2015-3-9

    洗滌在ELISA過程中雖不是一個反應步驟,但卻也決定著實驗的成敗。ELSIA就是靠洗滌來達到分離游離的和結合的酶標記物的目的。

ELISA試劑盒洗滌液的使用原則:

1.某一項目的洗液建議使用該試劑盒內的洗液;

2.同一elisa試劑盒洗液用完了,建議采用同一批號的洗液;

3.同一批號的洗液也用完了,建議采用同一項目的試劑洗液;

4.同一項目的洗液用完了,建議使用該項目其他廠家的洗液;

5.同一項目所有廠家都用完了,建議采用同一系列項目的洗液(比如甲乙丙丁戊庚肝抗體檢測,屬于肝炎系列,急用時可以暫時混用);

6.不建議國產洗液與進口洗液混用,也更不建議不同系列項目的洗液混用,這兩點都是因為洗液的配置成分不同,特別是不同項目的洗液(正規試劑廠家),主要組分都不太一樣。雖然對強陽性標本影響不是很大,但對于臨界陽性陰性(灰區)標本影響較大,所以不提倡不同系列項目洗液混用。

ELISA試劑盒的洗滌方式:

1)浸泡式

a.吸干或甩干孔內反應液;

b.用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去);

c.浸泡,即將洗滌液注滿板孔,放置1-2分鐘,間歇搖動,浸泡時間不可隨意縮短;

d.吸干孔內液體。吸干應*,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干;

e.重復操作cd,洗滌3-4次(或按說明規定)。在間接法中如本底較高,可增加洗滌次數或延長浸泡時間。

2)流水沖洗式

流水沖洗法zui初用于小珠載體的洗滌,洗滌液僅為蒸餾水甚至可用自來水。洗滌時附接一特殊裝置,使小珠在流水沖擊下不斷地滾動淋洗,持續沖洗2分鐘后,吸干液體,再用蒸餾水浸泡2分鐘,吸干即可。浸泡式猶如盆浴,流水沖洗式則好比淋浴,其洗滌效果更為*,且也簡便、快速。已有實驗表明,流水沖洗式同樣也適用于微量滴定板的洗滌。洗滌時設法加大水流量或加大水壓,讓水流沖擊板孔表面,洗滌效果更佳。

ELISA操作中,洗滌是zui主要的關鍵技術,應引起操作者的高度重視,操作者應嚴格按要求洗滌,不得馬虎。


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