本公司所銷售的大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子B(VEGF-B)elisa試劑盒只供科研，保證質(zhì)量，如有任何質(zhì)量問題，本司一律包退包換，咨詢。
大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子B(VEGF-B)elisa試劑盒測試步驟：
（1）仔細切開覆蓋在孔板上的箔片，從微孔板底部用手指輕輕頂出所用的孔板。注意不要損傷不使用的孔板上的條或孔，而且應將其立即用塑料袋密封放入2-8℃的冰箱保存，以防止瓊脂變干；
（2）揭開覆蓋在孔板上的箔片，每孔加入80mL牛奶樣品。并分別加入80mL的陰性和陽性質(zhì)控，加入樣品時應避免交叉污染；
（3）用密封膠將孔板密封，置于65℃恒溫箱或水浴箱中孵育直到陰性質(zhì)控轉(zhuǎn)化成淺黃綠色（參照每批質(zhì)量檢測報告,大約需要1小時45分鐘）。
注：如果是采用水浴進行孵育的話，請注意避免水進入微孔。樣品孵育時間不能超過質(zhì)檢報告中說明的時間，否則檢測靈敏度會下降。
大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子B(VEGF-B)elisa試劑盒操作不當將引起較大的誤差，以下敘述各個步驟中的影響因素：
1.加樣，加樣時速度不可太快，避免將標本加在孔壁上部 ，并注意不要濺出或產(chǎn)生氣泡，產(chǎn)生氣泡可以減少標本與包被物的接觸，降低試劑的敏感性。不要讓吸頭接觸孔底部，以防破壞包被物，吸附血清內(nèi)的蛋白，造成假陽性。
2.溫育，溫育過程中，反應板不宜疊放，以保證各板的溫度都能迅速平衡。
3.洗滌，洗滌是ELISA測定過程中決定實驗成敗的一個關(guān)鍵步驟。其目的是去除反應體系中與反應無關(guān)的成分、未結(jié)合的酶結(jié)合物以及反應過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.顯色，顯色是 ELISA中的zui后一步溫育反應，顯色受時間和溫度的影響，一般37℃反應30分鐘可使顯色充分，如果縮短反應時間或者降低反應溫度均可影響檢測的下限。
5.比色，ELISA顯色的結(jié)果必須通過酶標儀進行檢測，有兩個重要的原因：一是不同的個體的色覺存在差異，如果僅憑肉眼判斷，則結(jié)果重復性差，并且難以形成統(tǒng)一的判斷標準，尤其是對于HBeAb、HBcAb這樣的檢測項目；二是日益頻繁的醫(yī)療糾紛要求臨床實驗室必須對ELISA檢測的原始吸光度值，陰陽性判斷結(jié)果等原始數(shù)據(jù)進行保存，否則面對醫(yī)療糾紛時將無法舉證。
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