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小鼠堿性磷酸酶(ALP)elisa試劑盒

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更新時間:2018-01-28 00:55:58瀏覽次數:437次

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小鼠堿性磷酸酶(ALP)elisa試劑盒可以定量測定,溶液中的抗原物質,應用酶免吸附技術進行比色測定,依據光密度值的變化,可以定量。預計用細胞分光光度計可對組織內的抗原進行免疫酶技術的定量測定。

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小鼠堿性磷酸酶(ALP)elisa試劑盒標本的保存方法:

血清標本宜在新鮮時檢測.如有細菌污染,菌體中可能含有內源性HRP,也會產生假陽性反應.如在冰箱中保存過久,其中的可發生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深.一般說來,在5天內測定的血清標本可放置于4,超過一周測定的需低溫冰存.凍結血清融解后,蛋白質局部濃縮,分布不均,應充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛倒混和,不要在混勻器上強烈振蕩.混濁或有沉淀的血清標本應先離心或過濾,澄清后再檢測.反復凍融會使抗體效價跌落,所以測抗體的血清標本如需保存作多次檢測,宜少量分裝冰存.保存血清自采集時就應注意無菌操作,也可加入適當防腐劑.

小鼠堿性磷酸酶(ALP)elisa試劑盒"間接法步驟:

1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4過夜;

2.次日洗滌3次;

3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37孵育1小時,洗滌;

4.(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml;

5.37孵育35-60分鐘,洗滌;

6.zui后一遍用DDW洗滌。

7.加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37 10~30分鐘。

8.終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。

9.結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+"、“-"號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。

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