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大鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)elisa試劑盒

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更新時間:2018-05-21 08:19:09瀏覽次數(shù):235次

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大鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)elisa試劑盒可以定量測定,溶液中的抗原物質(zhì),應(yīng)用酶免吸附技術(shù)進行比色測定,依據(jù)光密度值的變化,可以定量,預(yù)計用細胞分光光度計可對組織內(nèi)的抗原進行免疫酶技術(shù)的定量測定。

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大鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)elisa試劑盒*標記抗體的稀釋方法:

打開瓶蓋前請離心,收集瓶壁上的溶液。臨用前以*標記抗體稀釋液稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計算好的每次實驗所需的總量配制(每孔100μl),實際配制時應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl*標記抗體加990μl*標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制。

大鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)elisa試劑盒操作中應(yīng)注意以下5個方面:

 1.隨著其他因素影響,某些抗體在機體內(nèi)的含量發(fā)生大幅波動,因此有必要對標本進行預(yù)處理,例如對血清標本作適當稀釋,或離心分離血脂等。間接法測定中,標本適當稀釋還可降低非特異性反應(yīng)。

2.加樣一般使用加液器,在ELISA中一般有4次加樣:加標本、加酶結(jié)合物、加底物和加終止液。加標本時必須每份標本使用一支移液器吸嘴,以免交叉污染。加酶結(jié)合物、底物和終止液時則不需更換吸嘴。

3.在成批手工檢測中,還應(yīng)注意操作時差的影響。加樣及混勻時間的差異,使抗原抗體反應(yīng)和酶促反應(yīng)時間不*,對競爭法及定量檢測影響很大,不注意可能會導(dǎo)致錯誤結(jié)果或定量不準。

4.洗滌是ELISA操作過程中決定實驗成敗的一個關(guān)鍵步驟。目的是除去未結(jié)合的免疫反應(yīng)物,終止抗原抗體反應(yīng),除去標本中與反應(yīng)無關(guān)的成分、游離的酶標物以及反應(yīng)過程中吸附于固相載體上的非特異性物質(zhì)。可用洗板機洗板或手工洗板,前者洗滌質(zhì)量較好,各反應(yīng)孔洗滌效果均一,批內(nèi)、批間差異小,手工洗板應(yīng)注意控制各孔洗滌效果,差異不宜太大。

5.準確判定結(jié)果須使用ELISA測讀儀(酶標儀),比色法判讀可選擇單波長或雙波長,根據(jù)反應(yīng)液顏色的不同選用不同波長的濾光片,以空白孔校零測定反應(yīng)孔的吸光度值(A值)。酶標儀具有良好的重復(fù)性。

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