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小鼠纖溶酶抗纖溶酶復合物elisa試劑盒發展前景臨床測定技術的發展主要在于方法學的發展,而方法學的發展依托于試劑生產技術不斷進步更新和型標記物的應用。分子生物學正在并zui終肯定會讓對整個生命科學有一個全面而*的認識,其對免疫測定技術發展的影響也是直接而又有效的,對以前一些難以檢測的生物活性物質的測定,并且大大提高了檢測的靈敏度和特異性。
操作中應注意以下5個方面:
1.隨著其他因素影響,某些抗體在機體內的含量發生大幅波動,因此有必要對標本進行預處理,例如對血清標本作適當稀釋,或離心分離血脂等。間接法測定中,標本適當稀釋還可降低非特異性反應。
2.加樣一般使用加液器,在ELISA中一般有4次加樣:加標本、加酶結合物、加底物和加終止液。加標本時必須每份標本使用一支移液器吸嘴,以免交叉污染。加酶結合物、底物和終止液時則不需更換吸嘴。
3.在成批手工檢測中,還應注意操作時差的影響。加樣及混勻時間的差異,使抗原抗體反應和酶促反應時間不*,對競爭法及定量檢測影響很大,不注意可能會導致錯誤結果或定量不準。
4.洗滌是ELISA操作過程中決定實驗成敗的一個關鍵步驟。目的是除去未結合的免疫反應物,終止抗原抗體反應,除去標本中與反應無關的成分、游離的酶標物以及反應過程中吸附于固相載體上的非特異性物質。可用洗板機洗板或手工洗板,前者洗滌質量較好,各反應孔洗滌效果均一,批內、批間差異小,手工洗板應注意控制各孔洗滌效果,差異不宜太大。
5.準確判定結果須使用ELISA測讀儀(酶標儀),比色法判讀可選擇單波長或雙波長,根據反應液顏色的不同選用不同波長的濾光片,以空白孔校零測定反應孔的吸光度值(A值)。酶標儀具有良好的重復性。
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