產品名稱:人高敏甲狀腺素elisa試劑盒
產品用途:科研實驗
公司服務:免費代測
產品規格:96T
人高敏甲狀腺素elisa試劑盒標本的保存方法:
血清標本宜在新鮮時檢測.如有細菌污染,菌體中可能含有內源性HRP,也會產生假陽性反應.如在冰箱中保存過久,其中的可發生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深.一般說來,在5天內測定的血清標本可放置于4℃,超過一周測定的需低溫冰存.凍結血清融解后,蛋白質局部濃縮,分布不均,應充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛倒混和,不要在混勻器上強烈振蕩.混濁或有沉淀的血清標本應先離心或過濾,澄清后再檢測.反復凍融會使抗體效價跌落,所以測抗體的血清標本如需保存作多次檢測,宜少量分裝冰存.保存血清自采集時就應注意無菌操作,也可加入適當防腐劑.
操作中應注意以下5個方面:
1.隨著其他因素影響,某些抗體在機體內的含量發生大幅波動,因此有必要對標本進行預處理,例如對血清標本作適當稀釋,或離心分離血脂等。間接法測定中,標本適當稀釋還可降低非特異性反應。
2.加樣一般使用加液器,在ELISA中一般有4次加樣:加標本、加酶結合物、加底物和加終止液。加標本時必須每份標本使用一支移液器吸嘴,以免交叉污染。加酶結合物、底物和終止液時則不需更換吸嘴。
3.在成批手工檢測中,還應注意操作時差的影響。加樣及混勻時間的差異,使抗原抗體反應和酶促反應時間不*,對競爭法及定量檢測影響很大,不注意可能會導致錯誤結果或定量不準。
4.洗滌是ELISA操作過程中決定實驗成敗的一個關鍵步驟。目的是除去未結合的免疫反應物,終止抗原抗體反應,除去標本中與反應無關的成分、游離的酶標物以及反應過程中吸附于固相載體上的非特異性物質。可用洗板機洗板或手工洗板,前者洗滌質量較好,各反應孔洗滌效果均一,批內、批間差異小,手工洗板應注意控制各孔洗滌效果,差異不宜太大。
5.準確判定結果須使用ELISA測讀儀(酶標儀),比色法判讀可選擇單波長或雙波長,根據反應液顏色的不同選用不同波長的濾光片,以空白孔校零測定反應孔的吸光度值(A值)。酶標儀具有良好的重復性。
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