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人蛋白質二硫鍵異構酶elisa試劑盒

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所在地鹽城市

更新時間:2015-03-20 14:29:09瀏覽次數:192次

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人蛋白質二硫鍵異構酶elisa試劑盒實驗原理:用純化的MT抗體包被微孔板,制成固相載體,往微孔中依次加入標本或標準品、*化的MT抗體、HRP標記的親和素,經 過*洗滌后用底物(TMB)顯色。

人蛋白質二硫鍵異構酶elisa試劑盒組成:
1.30倍濃縮洗滌液20ml×17終止液6ml×1
2.酶標試劑6ml×18標準品(40U/L0.5ml×1
3.酶標包被板12孔×89標準品稀釋液1.5ml×1

 4.樣品稀釋液6ml×110說明書1
 5.顯色劑A6ml×111封板膜2
 6.顯色劑B6ml×1/12密封袋1

人蛋白質二硫鍵異構酶elisa試劑盒實驗備注:
1. 用戶在初次使用試劑盒時,應將各種試劑管離心數分鐘,以便試劑集中到管底。
2. 每次實驗留一孔作為空白調零孔,該孔不加任何試劑,只是zui后加底物溶液及終止液。測量時先用此孔調OD值至零。
3. 為防止樣品蒸發,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜。
4. 未使用完的酶標板或者試劑,請于2-8℃保存。標準品、*標記抗體工作液、辣根過氧化物酶標記親和素工作液請依據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的標準品、*標記抗體工作液、或辣根過氧化物酶標記親和素工作液。
5. 建議檢測樣品時均設雙孔測定,以保證檢測結果的準確性。

ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1)酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取方陣法"(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統里準確地滴定其工作濃度。
(2)酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無色。有些供氫體(OPD)有潛在的致癌作用,應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMBABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入

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