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公司動態

腎上腺素的提取和測定

閱讀:352發布時間:2016-6-27

腎上腺素的提取和測定

目的要求

1、了解腎上腺素的結構和功能

2、學習提取及測定腎上腺素的原理和方法

實驗原理

腎上腺素是腎上腺髓質分泌的激素,在微酸性介質中,腎上腺素與三價鐵和鄰菲羅琳混合液反應,生成三亞鐵配位化合物,即亞鐵鄰菲羅琳離子,該配位化合物在510nm處有zui大吸收。本法具有簡易、迅速、選擇性好、靈敏度高的特點。

試劑和器材

1、試劑

腎上腺素標準溶液:取腎上腺素約20mg精密稱重置1000mL容量瓶中,加0.02mol/L  HCI使之溶解,并用水稀釋至刻度,搖勻。

  顯色劑:取0.1988g鄰菲羅琳水合物,加1mol/L  HCI2mL,硫酸鐵銨0.16g,用水溶解并稀釋至100ml,搖勻。既得。

2、材料

新鮮豬腎上腺

3、器材

試管10mL(×9),錐形瓶50mL,研缽,漏斗,濾紙,分光光度計。

操作方法

1、制作標準曲線

取6支試管編號后,加入試劑:加畢,混勻。放置3min,加水稀釋至刻度,用1cm比色杯,試劑空白為參比,測定510nm處吸光值,繪制標準曲線。

2、腎上腺素的提取

 取新鮮豬腎上腺2g,置于研缽中,加入5mL  0.1mol/L  HCI及少許海砂研磨成糊狀。移入50mL錐形瓶中,再加15mL  0.1mol/L HCI。在沸水浴中煮5min后,加入7mL10%乙酸鈉,在煮1min。冷卻后,過濾收集濾液。

3、樣品測定

取3支試管編號后,分別加入試劑,與標準曲線同時作比色測定:加畢,混勻,放置3min,加水稀釋至刻度,用1cm比色杯,試劑空白為參比,測定510nm處吸光值,從標準曲線中可查出樣品中腎上腺素的含量。

注意事項

腎上腺素對光極不穩定,故在稱量及其他操作中應盡量縮短時間、避光,以免引起誤差。


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