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液相色譜儀測定葡萄中有機酸的含量

閱讀:2140發布時間:2017-5-27

有機酸是果品中重要的風味營養成分,廣泛存在于各種植物果實中,一些有機酸還是生物體重要的代謝中間產物。葡萄果實中的有機酸主要有酒石酸、蘋果酸和檸檬酸,其組成與含量是決定葡萄果實風味和品質的重要因素之一。酒石酸是葡萄果實的特征酸,其它水果中未見積累,其酸度很強,是葡萄、葡萄酒酸度的主要貢獻者。果實的味感大部分取決于甜味和酸味、苦味之間的平衡,味感質量則取決于這些味感之間的和諧程度,有機酸的種類及其濃度調節著“酸堿的平衡”,必然會影響葡萄、葡萄酒的酸味。因此,對有機酸的準確定量測定在果品品質鑒定中占有重要地位 。

 

 

有機酸的分析方法常見的有酸堿滴定法、薄層色譜法、氣相色譜法、離子色譜法、液相色譜法等。酸堿滴定法僅適用于常量分析,且只能測定總酸含量;薄層色譜法度和靈敏度較低;氣相色譜法必須進行復雜的衍生化,操作繁瑣誤差較大;離子色譜法對樣品的處理要求較高,前處理非常復雜,耗時長。液相色譜法前處理比較簡單,適合高沸點的非揮發性有機酸的測定,而且具有操作簡單,準確度高、重現性好的優點,可以同時測定樣品中多種有機酸,目前有著廣泛的應用。

實驗采用反相液相色譜測定有機酸的方法,分析速度快,靈敏度高,結果準確。

 

實驗儀器設備:

LC-600B型液相色譜儀

LC-600B智能全控液相色譜系統由1臺P600B高壓恒流泵、1臺UV600B紫外檢測器與1臺SCL600B系統控制器直接構成梯度分析系統。*采用柱塞浮動式安裝方式,增強儀器性能的穩定性和使用的持久性。

廣泛應用于研究開發、醫藥檢驗、食品檢測、化工分析、環境監測等眾多分析領域。

*

pH計

 

標準品的配置:

準確稱取抗壞血酸50mg,酒石酸250mg,蘋果酸、檸檬酸各500mg,乳酸、乙酸各1000mg,用流動相溶解并定容至50mL作為標準儲備液。將標準儲備液用流動相稀釋成不同濃度進樣分析,以有機酸濃度(mg/mL)為橫坐標,峰面積為縱坐標,建立線性回歸方程。

 

樣品測定方法:

準確稱取鮮葡萄100g,破碎后,加100mL蒸餾水,高頻超聲提取40min,過濾后的溶液定容至250mL。進樣前經0.45μm濾膜過濾,計算各有機酸含量。

 

色譜條件:

色譜柱

UltimateXB-C18柱(4.6×250(mm),5μm)

流動相

為甲醇 0.01mol/LK2HPO4(3∶97)溶液,用磷酸調節pH值至2.0

流速

0.5mL/min

進樣量

20μL

檢測波長

210nm

柱溫

25℃

使用前用0.45μm濾膜過濾,超聲脫氣

 

 


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