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色譜的基礎入門知識你了解嗎?

閱讀:814發布時間:2018-1-2

一、色譜的起源

    色譜法起源于20世紀初,1906年俄guo科學家米哈伊爾·茨維特用碳酸鈣填充豎立的玻璃管,以石油醚洗脫植物色素的提取液,經過一段時間洗脫之后,植物色素在碳酸鈣柱中實現分離,由一條色帶分散為數條平行的色帶。由于這一實驗將混合的植物色素分離為不同的色帶,因此茨維特將這種方法命名為Хроматография,這個單詞zui終被英語等拼音語言接受,成為色譜法的名稱。漢語中的色譜也是對這個單詞的意譯。   

    茨維特并非科學家,他對色譜的研究以俄語發表在俄guo的學術雜志之后不久,*次世界大戰爆發,歐洲正常的學術交流被迫終止。這些因素使得色譜法問世后十余年間不為學術界所知,直到1931年德國柏林威廉皇帝研究所的庫恩將茨維特的方法應用于葉紅素和葉黃素的研究,庫恩的研究獲得了廣泛的承認,也讓科學界接受了色譜法,此后的一段時間內,以氧化鋁為固定相的色譜法在有色物質的分離中取得了廣泛的應用,這就是今天的吸附色譜

1.色譜法的發展歷史表

1906

Tswett

用碳酸鈣作吸附劑分離植物色素。zui先提出色譜概念

1931

Kuhn,Lederer 

用氧化鋁和碳酸鈣分離α-、β和γ-胡蘿卜素,使色譜法開始為人們所重視

1938

Lzmailov,Shraiber

zui先使用薄層色譜法

1938

Taylor,Uray

用離子交換色譜法分離鋰和鉀的同位素

1941

Martin,Synge

提出色譜塔板理論;發明液-液分配色譜;語言了氣體可作為流動相(即氣象色譜)

1944

Consden等

發明了紙色譜

1949

Macllean

在氧化鋁中加入淀粉黏合劑制作薄層板,使薄層色譜進入實用階段

1952

Martin,James

從理論和實踐方面完善了氣-液分配色譜法

1956

Van Demmter等

提出色譜速率理論,并應用于氣相色譜

1957

Stein和Morre

發明基于離子交換色譜的氨基酸分析儀器

1958

Golay

發明毛細管柱氣相色譜

1959

Porath,Flodin

發表凝膠過濾色譜的報告

1964

Moore

發明凝膠滲透色譜

1965

Giddings

發展了色譜理論,為色譜學的發展奠定了理論基礎

1975

Small

發明了以離子交換劑為固定相、強電解質為流動相,采用抑制性電導檢測的新型離子色譜法

1981

orgenson等

創立了毛細管電脈法

              

二、色譜定義

1.色譜法:利用組分在兩相間分配系數不同而進行分離的技術

2.流動相:攜帶樣品流過整個系統的流體

3.固定相:靜止不動的一相,色譜柱

3.色譜是一種分離技術.

4.色譜的主要目的是對混合物中的目標物分離和定量

 

三、色譜分類

1、液相色譜 High Performance Liquid Chromatography (HPLC)

2、氣相色譜 Gas Chromatography (GC)

3、薄層色譜 Thin-Layer Chromatography (TLC)

4、毛細管電泳 Capillary Electrophoresis(CE)

 

四、色譜原理

    利用樣品混合物中各組分理、化性質的差異,各組分程度不同的分配到互不相溶的兩相中。當兩相相對運動時,各組分在兩相中反復多次重新分配,結果使混合物得到分離。

 

五、色譜優缺點

1、同時分析

2、分離性能好

3、靈敏度高 (ppm-ppb)

4、進樣量小 (1-100uL)

HPLC vs GC

液相色譜:以液體作為流動相的色譜分離方法。

1、適用于高沸點、大分子、強極性和熱穩定性差的化合物的分析。

2、流動相具有運載樣品分子和選擇性分離的雙重作用。

氣相色譜:以氣體作為流動相的色譜分離方法。

1、適用于沸點較低、熱穩定性好的中小分子化合物的分析。

2、流動相只起運載樣品分子的能力。

 

六、色譜的應用

經過多年的發展,離子色譜已經在生產生活的各種領域發揮著重要的作用。

1.環境分析

    離子色譜在其產生初期zui重要的應用便是環境樣品的分析,其應用對象主要是環境樣品中各種陰、陽離子的定性、定量分析。
    作為一種快速準確而有效果分析方法,離子色譜廣泛應用于微電子、電力工業中高純水、高純試劑痕量雜質的分析。

2.食品分析

    與傳統的分析方法相比,離子色譜法的突出優點是多組分同時進行分析,樣品處理簡單,因此成為食品和飲料中陰陽離子、有機酸、胺和糖類分析的較好方法。

3.聯用技術

    離子色譜聯用技術是離子色譜發展的一個方向。聯用技術的發展,使得離子色譜分析技術的應用范圍和檢測靈敏度有了很大的提高,關于離子色譜--原子吸收(發射)光譜、離子色譜--電感耦合等離子體、離子色--質譜的聯用已有不少報道。

 

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