兔子表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒 詳細說明
產品中文名稱：兔子表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒
產品英文名稱：Rabbit Epidermal growth factor,EGF ELISA Kit
實驗方法：酶聯免疫法/酶免法（ELISA）
兔子表皮生長因子(EGF)酶聯免疫分析（ELISA試劑盒）組成：
試劑盒組成
48孔配置
96孔配置
2-8℃保存
標本收集 注意事項：
1）在收集標本前都必須有一個完整的計劃，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。
2）我們提倡新鮮標本盡早檢測，對收集后及時進行檢測。說明：
樣品類型： 標本必須為液體，不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清、組
織勻漿等。1ml的全血可得到0.5ml的血清 或血漿。每個標本量收集體積＝100ul×檢測種類。取材前須向
銷售人員索要說明書。
樣品采集： 收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集后當天進行檢測的標本，儲存在4℃
備用，如有特殊原因需要周期收集標本， 將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復凍
融。標本2-8℃可保存48小時，-20℃可保存1個月。-70度可保存6個月。部分激素類標本需添加*。
四、液體類標本：
包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
1）血清：
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有
沉淀形成，應再次離心。
2）血漿：
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-
3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次
離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4）細胞培養上清：
A、檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/ 分）。仔細收集上清。
B、檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍
融，以使細胞破壞并 放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程
中如有沉淀形成，應再次離心。
5）組織標本：
切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8
℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000
轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
人抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)Elisa試劑盒標本要求
1．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
2．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可
將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。
ELISA試劑盒操作步驟
方法一 用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:
1. 包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1～10μg／ml。在每個聚苯
乙烯板的反應孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。(簡稱洗
滌，下同)。
2. 加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中，置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。(
同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔)。
3. 加酶標抗體：于各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育
0.5～1小時，洗滌。
4. 加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。
5. 終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內顏色越深，陽性程度越強，陰性反
應為無色或極淺，依據所呈顏色的深淺，以“+"、“-"號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于
450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對照孔調零后測各孔OD值，若大于規定的陰性對照OD值的2.1
倍，即為陽性。
方法二 用于檢測未知抗體的間接法：
用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg／ml，每孔加0.1ml，4℃過夜。次日洗滌3次。
↓
加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做
空白、陰性及陽性孔對照)
↓
于反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,zui后一遍用
DDW洗滌。
參照說明書（具體說明書請發郵件::yanhuibio）
靈敏度： 具體請查看說明書.
產品用途: 科研ELISA檢測試劑盒.提供實驗代測服務.
科研樣品 ELISA 檢測服務：
凡購買本公司目錄任何一種檢測試劑盒，您只需將需要檢測的動物種類和檢測指標（如傳染病系列類、細
胞因子類）及標本數量（ 48T/96T ）通知公司業務員即可。在接到客戶標本當 日起，現貨產品一周內將
檢測報告交到客戶手中！
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人,小鼠,大鼠,豬,兔,犬，其它動物細胞因子;細胞凋亡,活性多肽、自身抗體 ,血栓與止血,
骨代謝,肝纖維化,腫瘤,激素內分泌、自身抗體科研ELISA檢測試劑盒
產品詳細情況請
品種齊全：人，小，鼠，大鼠，豚鼠，豬，狗，牛，羊，猴，兔，等動物種屬
